CMT-93

Linia komórkowa CMT93 stanowi mysi model raka jelita grubego, uzyskany z nowotworu odbytnicy wywołanego chemicznie u myszy rasy C57BL/ICRF. Nowotwór powstał w wyniku ekspozycji na octan metyloazoksymetanolu (octan MAM), silny czynnik rakotwórczy. Linia CMT93 pochodzi z czwartej generacji przeszczepów in vivo pierwotnego nowotworu i została wyhodowana przy użyciu technik selektywnej trypsynizacji w celu izolacji populacji nabłonkowych przy jednoczesnym usuwaniu zanieczyszczeń mezenchymalnych. Dzięki wielokrotnym subkulturowi i oczyszczaniu uzyskana linia komórkowa wykazywała stabilną morfologię nabłonkową i wzorzec wzrostu.

In vitro komórki CMT93 rosną w spójnych skupiskach nabłonkowych i wykazują charakterystyczne cechy zróżnicowanych komórek nabłonka jelitowego. Mikroskopia elektronowa ujawniła obecność mikrokosmków z pasmami glikoprotein, połączeń desmosomalnych oraz sporadycznych struktur przypominających zraziki, co sugeruje częściowe zachowanie normalnej architektury nabłonka odbytnicy. Komórki te charakteryzują się wysoką adhezyjnością i osiągają konfluencję w ciągu około 7 dni po podziale w stosunku 1:2. Chociaż przeważają komórki nabłonkowe, wczesne pasażowania obejmowały populacje mieszane, które zostały rozdzielone poprzez sekwencyjne selektywne subkulturowanie. Linia była utrzymywana przez wiele pasażowań i pomyślnie zamrożona do długoterminowego wykorzystania.

CMT93 jest szeroko stosowana w badaniach nad nowotworami przewodu pokarmowego, szczególnie w badaniach dotyczących karcynogenezy jelita grubego, interakcji nabłonkowo-mezenchymalnych, odpowiedzi immunologicznej oraz interakcji między mikroorganizmami a gospodarzem. Wykorzystuje się ją również w badaniach profilowania krótkich powtórzeń tandemowych (STR) w celu potwierdzenia autentyczności linii komórkowych myszy w obrębie gatunku, co potwierdza jej wyjątkową tożsamość i wartość jako sprawdzonego modelu w badaniach przedklinicznych.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym