CMT-93

A linha celular CMT93 é um modelo murino de carcinoma colorretal estabelecido a partir de um tumor retal induzido quimicamente num rato C57BL/ICRF. O tumor originou-se na sequência da exposição ao acetato de metilazoximetanol (acetato de MAM), um potente carcinogéneo. A CMT93 foi derivada da quarta geração de transplantes in vivo do tumor original e cultivada utilizando técnicas de tripsinização seletiva para isolar populações epiteliais, removendo simultaneamente contaminantes mesenquimais. Através de subculturas e purificações repetidas, a linha celular resultante apresentou uma morfologia epitelial e um padrão de crescimento estáveis.

In vitro, as células CMT93 crescem em aglomerados epiteliais coerentes e exibem características distintivas de células epiteliais intestinais diferenciadas. A microscopia eletrónica revelou a presença de microvilosidades com cadeias de glicoproteínas, junções desmosomais e estruturas ocasionalmente semelhantes a ácinos, sugerindo a retenção parcial da arquitetura epitelial retal normal. Estas células são altamente aderentes e atingem a confluência em aproximadamente 7 dias após uma divisão na proporção de 1:2. Embora predominantemente epiteliais, as primeiras passagens incluíram populações mistas, que foram resolvidas através de subculturas seletivas sequenciais. A linha tem sido mantida ao longo de inúmeras passagens e criopreservada com sucesso para utilização a longo prazo.

A CMT93 é amplamente utilizada na investigação do cancro gastrointestinal, particularmente em estudos que exploram a carcinogénese colorretal, as interações epiteliais-mesenquimais, as respostas imunitárias e as interações microbio-hospedeiro. É também utilizada em estudos de perfilagem de repetições em tandem curtas (STR) para apoiar a autenticação intraespécies de linhas celulares de ratinho, confirmando a sua identidade única e valor como modelo validado na investigação pré-clínica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia