CMT-93

Rakuliin CMT93 on hiire kolorektaalse kartsinoomi mudel, mis on loodud C57BL/ICRF hiire keemiliselt indutseeritud pärasoolekasvaja põhjal. Tuumor tekkis pärast kokkupuudet tugeva kantserogeeni metüülasoksümetanoolatsetaadiga (MAM-atsetaat). CMT93 saadi algse tuumori neljandast in vivo siirdatud põlvkonnast ja kultiveeriti selektiivsete tripsiniseerimistehnikate abil, et isoleerida epiteelirakkude populatsioonid, eemaldades samal ajal mesenküümilised saasteained. Korduva subkultiveerimise ja puhastamise tulemusena näitas saadud rakuliin stabiilset epiteelimorfoloogiat ja kasvumustrit.

In vitro kasvavad CMT93 rakud ühtsetes epiteelirakkude kimpudes ja näitavad diferentseerunud sooleepiteelirakkude iseloomulikke tunnuseid. Elektronmikroskoopia näitas glükoproteiini ahelatega mikrovillide, desmosomaalsete liideste ja aeg-ajalt esinevate acinus-laadsete struktuuride olemasolu, mis viitab normaalse rektaalepiteeli arhitektuuri osalisele säilimisele. Need rakud on väga adhesiivsed ja kasvavad konfluentsiks umbes 7 päeva pärast 1:2 jagamist. Kuigi need on valdavalt epiteelrakud, sisaldasid varased passaažid segapopulatsioone, mis lahendati järjestikuste selektiivsete subkultiveerimiste abil. Liini on säilitatud arvukate passaažide jooksul ja edukalt krüokonserveeritud pikaajaliseks kasutamiseks.

CMT93-t kasutatakse laialdaselt seedetrakti vähi uurimisel, eriti uuringutes, mis käsitlevad kolorektaalse vähi teket, epiteeli-mesenküümilisi interaktsioone, immuunvastuseid ja mikroobide-peremehe interaktsioone. Seda kasutatakse ka lühikeste tandemkorduste (STR) profiilide uuringutes, et toetada hiire rakuliinide liigisisest autentimist, kinnitades selle unikaalset identiteeti ja väärtust valideeritud mudelina prekliinilistes uuringutes.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest