Pāriet uz saturu
CMT-93
Audums
Taisnā zarna
Slimība
Peles taisnās zarnas karcinoma
Sinonīmi
CMT-93, CMT 93, C57 Mouse Tumor 93

Dokumenti

CMT-93

Cell line · Preces numurs 305761

The CMT93 cell line is a murine colorectal carcinoma model established from a chemically induced rectal tumor in a C57BL/ICRF mouse. The tumor originated ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

CMT93 šūnu līnija ir peles kolorektālās karcinomas modelis, kas izveidots no ķīmiski izraisīta taisnās zarnas audzēja C57BL/ICRF pelē. Audzējs izveidojās pēc iedarbības ar metilazoksimetanola acetātu (MAM acetātu), kas ir spēcīgs kancerogēns. CMT93 tika iegūta no sākotnējā audzēja ceturtās in vivo transplantācijas paaudzes un kultivēta, izmantojot selektīvas tripsinizācijas metodes, lai izdalītu epitēlija populācijas, vienlaikus noņemot mezenhīma piemaisījumus. Pēc atkārtotas subkultivēšanas un attīrīšanas iegūtā šūnu līnija uzrādīja stabilu epitēlija morfoloģiju un augšanas modeli.

In vitro CMT93 šūnas aug saskaņotos epitēlija kopumos un parāda diferencētu zarnu epitēlija šūnu raksturīgās pazīmes. Elektronu mikroskopija atklāja mikrovilnu klātbūtni ar glikoproteīnu pavedieniem, desmosomālajiem savienojumiem un atsevišķām acīnu līdzīgām struktūrām, kas liecina par normālas taisnās zarnas epitēlija arhitektūras daļēju saglabāšanu. Šīs šūnas ir ļoti adhezīvas un izaug līdz konfluencei aptuveni 7 dienu laikā pēc 1:2 sadalīšanas. Lai gan tās galvenokārt ir epitēlija šūnas, agrīnās pasāžās bija jauktas populācijas, kuras tika atdalītas, veicot secīgu selektīvu subkultivēšanu. Līnija ir uzturēta daudzos pasāžos un veiksmīgi kriokonservēta ilgtermiņa lietošanai.

CMT93 tiek plaši izmantota gastrointestinālā vēža pētījumos, jo īpaši pētījumos, kuros izpēta kolorektālās karcinogēzes, epitēlija un mezenhīmas mijiedarbību, imūnreakcijas un mikrobu un saimnieka mijiedarbību. Tā tiek izmantota arī īso tandematkārtojumu (STR) profilēšanas pētījumos, lai atbalstītu peles šūnu līniju autentifikāciju sugas ietvaros, apstiprinot tās unikālo identitāti un vērtību kā validētu modeli pirmsklīniskajos pētījumos.

Audums
Taisnā zarna
Slimība
Peles taisnās zarnas karcinoma
Sinonīmi
  • CMT-93
  • CMT 93
  • C57 Mouse Tumor 93

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Šūnu tips
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
CMT-93 (Cytion kataloga numurs 305761)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_1986

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C57BL/icrf
Donora vecums
1 gads un 7 mēneši