CMT-93

سلسلة الخلايا CMT93 هي نموذج لسرطان القولون والمستقيم الفئراني تم إنشاؤه من ورم مستقيمي ناتج عن تأثير كيميائي في فأر من سلالة C57BL/ICRF. نشأ الورم بعد التعرض لخلات الميثيلأزوكسيميثانول (MAM acetate)، وهو مادة مسرطنة قوية. تم اشتقاق CMT93 من الجيل الرابع من زراعة الورم الأصلي في الجسم الحي، وتم تربيته باستخدام تقنيات التريبسين الانتقائية لعزل المجموعات الظهارية مع إزالة الملوثات الوسيطة. من خلال إعادة التربية والتنقية المتكررة، أظهر خط الخلايا الناتج شكلاً ظهاريًا ونمط نمو مستقرين.

في المختبر، تنمو خلايا CMT93 في كتل ظهارية متماسكة وتظهر السمات المميزة للخلايا الظهارية المعوية المتمايزة. كشف الفحص المجهري الإلكتروني عن وجود زغابات دقيقة مع خيوط بروتين سكري، ووصلات ديسموسومية، وهياكل تشبه الأسينوس في بعض الأحيان، مما يشير إلى الاحتفاظ الجزئي بالبنية الظهارية الطبيعية للمستقيم. تتميز هذه الخلايا بدرجة عالية من الالتصاق وتنمو حتى تتلاقى في غضون 7 أيام تقريبًا بعد الانقسام بنسبة 1:2. على الرغم من أن الخلايا كانت ظهارية في الغالب، إلا أن المراحل المبكرة تضمنت مجموعات مختلطة، والتي تم حلها من خلال عمليات إعادة زراعة انتقائية متتالية. تم الحفاظ على السلالة لعدد كبير من المراحل وتم حفظها بالتبريد بنجاح للاستخدام طويل الأمد.

يستخدم CMT93 على نطاق واسع في أبحاث سرطان الجهاز الهضمي، لا سيما في الدراسات التي تستكشف تكوين سرطان القولون والمستقيم، والتفاعلات الظهارية-الوسطية، والاستجابات المناعية، والتفاعلات بين الميكروبات والمضيف. كما يتم استخدامه في دراسات تحديد ملامح التكرار الترادفي القصير (STR) لدعم المصادقة داخل النوع لخطوط الخلايا الفئرانية، مما يؤكد هويته الفريدة وقيمته كنموذج معتمد في الأبحاث ما قبل السريرية.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان