CMT-93

เซลล์ไลน์ CMT93 เป็นแบบจำลองมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักในหนูที่สร้างขึ้นจากเนื้องอกในทวารหนักซึ่งเกิดจากสารเคมีในหนู C57BL/ICRF เนื้องอกเกิดขึ้นหลังจากการสัมผัสกับเมทิลอะซอกซีเมทานอลอะซิเตท (MAM acetate) ซึ่งเป็นสารก่อมะเร็งที่รุนแรง CMT93 ถูกพัฒนาจากการปลูกถ่ายในร่างกายครั้งที่สี่ของเนื้องอกต้นฉบับและเพาะเลี้ยงโดยใช้เทคนิคการย่อยด้วยทริปซินแบบเลือกเพื่อแยกประชากรเซลล์เยื่อบุผิวในขณะที่กำจัดสิ่งปนเปื้อนจากเซลล์เนื้อเยื่อเกี่ยวพันออก ผ่านการเพาะเลี้ยงซ้ำและการทำให้บริสุทธิ์หลายครั้ง สายพันธุ์เซลล์ที่ได้แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาและรูปแบบการเจริญเติบโตของเซลล์เยื่อบุผิวที่คงที่

ในหลอดทดลอง เซลล์ CMT93 เติบโตเป็นกลุ่มก้อนของเซลล์เยื่อบุผิวที่เรียงตัวอย่างสม่ำเสมอ และแสดงลักษณะเด่นของเซลล์เยื่อบุผิวลำไส้ที่เจริญเต็มที่แล้ว การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนพบว่ามีไมโครวิลไลที่มีสายไกลโคโปรตีน, ข้อต่อเดสมอโซมอล, และโครงสร้างคล้ายอะซีนัสเป็นครั้งคราว ซึ่งบ่งชี้ว่ามีการคงอยู่บางส่วนของโครงสร้างเยื่อบุผิวลำไส้ตรงปกติ เซลล์เหล่านี้มีความยึดเกาะสูงและเจริญเติบโตจนเต็มแผ่นในประมาณ 7 วันหลังจากการแบ่งเซลล์ในอัตราส่วน 1:2 แม้ว่าจะส่วนใหญ่เป็นเซลล์เยื่อบุผิว แต่ในระยะแรกของการเพาะเลี้ยงพบว่ามีประชากรผสม ซึ่งได้ถูกแยกออกผ่านการเพาะเลี้ยงแบบคัดเลือกอย่างต่อเนื่อง สายพันธุ์นี้ได้รับการคงสภาพผ่านการเพาะเลี้ยงหลายรุ่นและสามารถเก็บรักษาด้วยการแช่แข็งเพื่อการใช้งานในระยะยาวได้สำเร็จ

CMT93 ถูกใช้อย่างแพร่หลายในการวิจัยมะเร็งทางเดินอาหาร โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาที่สำรวจการเกิดมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก การมีปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์เยื่อบุผิวกับเซลล์เมเซนไคม์ การตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกัน และการมีปฏิสัมพันธ์ระหว่างจุลินทรีย์กับโฮสต์ นอกจากนี้ยังถูกใช้ในงานศึกษาการวิเคราะห์ลักษณะทางพันธุกรรมแบบซ้ำสั้น (STR) เพื่อสนับสนุนการยืนยันตัวตนภายในสายพันธุ์ของเซลล์ไลน์หนู ซึ่งยืนยันถึงเอกลักษณ์เฉพาะและคุณค่าในฐานะแบบจำลองที่ได้รับการตรวจสอบแล้วในการวิจัยก่อนคลินิก

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.