CMT-93

La linea cellulare CMT93 è un modello murino di carcinoma colorettale ottenuto da un tumore rettale indotto chimicamente in un topo C57BL/ICRF. Il tumore ha avuto origine in seguito all'esposizione all'acetato di metilazossimetanolo (MAM acetato), un potente agente cancerogeno. La linea CMT93 è stata derivata dalla quarta generazione di trapianti in vivo del tumore originale ed è stata coltivata utilizzando tecniche di tripsinizzazione selettiva per isolare le popolazioni epiteliali rimuovendo al contempo i contaminanti mesenchimali. Attraverso ripetute subcolture e purificazioni, la linea cellulare risultante ha mostrato una morfologia epiteliale e un modello di crescita stabili.

In vitro, le cellule CMT93 crescono in aggregati epiteliali coerenti e presentano le caratteristiche distintive delle cellule epiteliali intestinali differenziate. La microscopia elettronica ha rivelato la presenza di microvilli con filamenti di glicoproteine, giunzioni desmosomiali e occasionali strutture simili ad acini, suggerendo una parziale conservazione della normale architettura epiteliale rettale. Queste cellule sono altamente aderenti e raggiungono la confluenza in circa 7 giorni dopo una divisione 1:2. Sebbene prevalentemente epiteliali, i primi passaggi includevano popolazioni miste, che sono state risolte attraverso subcolture selettive sequenziali. La linea è stata mantenuta per numerosi passaggi e crioconservata con successo per un uso a lungo termine.

La CMT93 è ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro gastrointestinale, in particolare negli studi che esplorano la carcinogenesi colorettale, le interazioni epitelio-mesenchimali, le risposte immunitarie e le interazioni microbo-ospite. È inoltre utilizzata negli studi di profilazione delle ripetizioni in tandem corte (STR) a supporto dell'autenticazione intraspecifica delle linee cellulari di topo, confermando la sua identità unica e il suo valore come modello convalidato nella ricerca preclinica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia