CMT-93

La línea celular CMT93 es un modelo de carcinoma colorrectal murino establecido a partir de un tumor rectal inducido químicamente en un ratón C57BL/ICRF. El tumor se originó tras la exposición al acetato de metilazoximetanol (acetato de MAM), un potente carcinógeno. La línea CMT93 se derivó de la cuarta generación de trasplantes in vivo del tumor original y se cultivó mediante técnicas de tripsinización selectiva para aislar las poblaciones epiteliales y eliminar los contaminantes mesenquimales. Tras repetidos subcultivos y purificaciones, la línea celular resultante presentó una morfología epitelial y un patrón de crecimiento estables.

In vitro, las células CMT93 crecen en grupos epiteliales coherentes y presentan las características distintivas de las células epiteliales intestinales diferenciadas. La microscopía electrónica reveló la presencia de microvellosidades con hebras de glicoproteínas, uniones desmosómicas y estructuras ocasionales similares a acinos, lo que sugiere una retención parcial de la arquitectura epitelial rectal normal. Estas células son altamente adherentes y alcanzan la confluencia en aproximadamente 7 días tras una división en una proporción de 1:2. Si bien son predominantemente epiteliales, los primeros pases incluían poblaciones mixtas, las cuales se resolvieron mediante subcultivos selectivos secuenciales. La línea se ha mantenido durante numerosos pases y se ha criopreservado con éxito para su uso a largo plazo.

La línea CMT93 se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer gastrointestinal, particularmente en estudios que exploran la carcinogénesis colorrectal, las interacciones epiteliales-mesenquimales, las respuestas inmunitarias y las interacciones entre microbios y el huésped. También se utiliza en estudios de perfiles de repeticiones en tándem cortas (STR) para respaldar la autenticación intraespecífica de líneas celulares de ratón, lo que confirma su identidad única y su valor como modelo validado en la investigación preclínica.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.