CMT-93

A CMT93 sejtvonal egy egér kolorektális karcinóma modell, amelyet egy C57BL/ICRF egérben kémiailag indukált rektális daganatból állítottak elő. A tumor egy erős rákkeltő anyag, a metil-azoxi-metanol-acetát (MAM-acetát) expozíciója után alakult ki. A CMT93 az eredeti tumor negyedik in vivo transzplantációs generációjából származik, és szelektív tripszinizációs technikák alkalmazásával tenyésztették, hogy izolálják az epiteliális populációkat, miközben eltávolították a mesenchimális szennyeződéseket. Ismételt szubkultiválás és tisztítás révén a kapott sejtvonal stabil epiteliális morfológiát és növekedési mintázatot mutatott.

In vitro a CMT93 sejtek koherens epiteliális csomókban növekednek, és a differenciált bélhámsejtek jellegzetes tulajdonságait mutatják. Elektronmikroszkópos vizsgálat glikoprotein szálakkal rendelkező mikrovillusok, deszmoszomális kapcsolódási pontok és esetenként acinus-szerű struktúrák jelenlétét mutatta ki, ami a normális rektális epiteliális szerkezet részleges megőrzésére utal. Ezek a sejtek erősen adhezívek, és 1:2 arányú osztás után körülbelül 7 nap alatt konfluenciát érnek el. Bár túlnyomórészt epitheliálisak, a korai passzázsok vegyes populációkat tartalmaztak, amelyek szekvenciális szelektív szubkultiválással szűrték ki. A vonalat számos passzázs során fenntartották, és hosszú távú felhasználás céljából sikeresen kriokonzerválták.

A CMT93-at széles körben használják a gyomor-bélrendszeri rák kutatásában, különösen a kolorektális karcinogenezist, az epiteliális-mesenchimális interakciókat, az immunválaszokat és a mikrobiális-gazda interakciókat vizsgáló tanulmányokban. Szerepel továbbá rövid tandem ismétlődés (STR) profilozási tanulmányokban is, amelyek az egérsejtvonalak fajon belüli hitelesítését támogatják, megerősítve egyedülálló identitását és értékét validált modellként a preklinikai kutatásban.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban