CMT-93

A linhagem celular CMT93 é um modelo murino de carcinoma colorretal estabelecido a partir de um tumor retal induzido quimicamente em um camundongo C57BL/ICRF. O tumor se originou após a exposição ao acetato de metilazoximetanol (acetato de MAM), um potente carcinógeno. A CMT93 foi derivada da quarta geração de transplantes in vivo do tumor original e cultivada utilizando técnicas seletivas de tripsinização para isolar populações epiteliais, removendo ao mesmo tempo contaminantes mesenquimais. Por meio de subculturas e purificações repetidas, a linhagem celular resultante apresentou uma morfologia epitelial e um padrão de crescimento estáveis.

In vitro, as células CMT93 crescem em aglomerados epiteliais coerentes e exibem características marcantes de células epiteliais intestinais diferenciadas. A microscopia eletrônica revelou a presença de microvilosidades com cadeias de glicoproteínas, junções desmosômicas e estruturas ocasionais semelhantes a ácinos, sugerindo retenção parcial da arquitetura epitelial retal normal. Essas células são altamente aderentes e atingem a confluência em aproximadamente 7 dias após uma divisão na proporção de 1:2. Embora predominantemente epiteliais, as primeiras passagens incluíam populações mistas, que foram resolvidas por meio de subculturas seletivas sequenciais. A linhagem foi mantida por inúmeras passagens e criopreservada com sucesso para uso a longo prazo.

A CMT93 é amplamente utilizada na pesquisa de câncer gastrointestinal, particularmente em estudos que exploram a carcinogênese colorretal, interações epiteliais-mesenquimais, respostas imunológicas e interações microbiano-hospedeiro. Ela também é utilizada em estudos de perfilagem de repetições em tandem curtas (STR) para apoiar a autenticação intraespecífica de linhagens celulares de camundongos, confirmando sua identidade única e seu valor como modelo validado na pesquisa pré-clínica.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.