
- Tissue
- Peau
- Disease
- Mélanome
- Metastatic site
- Poumon
- Synonyms
- Malme-3M, MALME 3M, Malme-3 M, MALME.3M, Malme3M, MALME3M, Malme-3 Monolayer
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MALME-3M
Cell line · Product number 305583
The MALME-3M cell line is a human melanoma model used extensively in cancer research to investigate mechanisms of melanoma progression, immune evasion, an...
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01General information
- Description
La lignée cellulaire MALME-3M est un modèle de mélanome humain largement utilisé dans la recherche sur le cancer pour étudier les mécanismes de progression du mélanome, d’évasion immunitaire et de résistance aux médicaments. Cette lignée cellulaire est dérivée d’une lésion de mélanome métastatique et présente plusieurs caractéristiques propres au mélanome agressif, notamment sa capacité à exprimer des marqueurs oncogéniques clés tels que HER2 et son rôle dans la modulation du microenvironnement tumoral. Des études menées sur la lignée MALME-3M ont mis en évidence sa réactivité aux thérapies ciblées, telles que les anticorps bispécifiques dirigés contre HER2, ainsi que son utilité dans l’évaluation des immunothérapies à médiation par les lymphocytes T.
Un domaine de recherche important impliquant les cellules MALME-3M concerne leur utilité dans l’étude des mécanismes d’évasion immunitaire du mélanome. Par exemple, des systèmes de co-culture associant MALME-3M à des cellules immunitaires permettent aux chercheurs d’explorer comment les cellules de mélanome modulent les réponses immunitaires par le biais de voies telles que PD-1/PD-L1 et d’autres inhibiteurs de points de contrôle immunitaires. Cette lignée cellulaire a également été génétiquement modifiée pour étudier les effets des perturbations génétiques sur les interactions immunitaires, ce qui en fait un outil précieux pour le criblage génétique à haut débit.
Outre leur rôle dans les études immunologiques, les cellules MALME-3M jouent un rôle déterminant dans l’étude des effets de l’hormone de croissance (GH) sur la progression du mélanome. Des recherches ont démontré que la GH peut accroître la résistance aux médicaments et le potentiel métastatique des cellules MALME-3M en modifiant la composition des exosomes dérivés du mélanome. Ces exosomes peuvent transférer la résistance aux médicaments et des facteurs favorisant la migration à d’autres cellules du microenvironnement tumoral. De telles études soulignent le potentiel du ciblage des voies de signalisation de la GH comme stratégie thérapeutique pour surmonter la chimiorésistance du mélanome.
- Tissue
- Peau
- Disease
- Mélanome
- Metastatic site
- Poumon
- Synonyms
- Malme-3M
- MALME 3M
- Malme-3 M
- MALME.3M
- Malme3M
- MALME3M
- Malme-3 Monolayer
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De type fibroblaste
- Cell type
- Fibroblaste
- Tumourigenic
- Oui, chez les souris nues
04Identifiers
- Citation
- MALME-3M (numéro de catalogue Cytion 305583)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1438
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- HLA A2, Aw30, B13, B40 (+/-), DRw7
06Handling and culture
- Culture medium
- IMDM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 25 mM d’HEPES, p: 1,0 mM de pyruvate de sodium, p: 3,024 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820800a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter 20 % de FBS au milieu de culture
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules de TrypLE Express, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Seeding density
- 3 × 10⁴ cellules/cm²
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Donor age
- 43 ans
- Ethnicity
- caucasien
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes