Mine otse sisu juurde
MALME-3M
Kude
Nahk
Haigus
Melanoom
Metastaaside asukoht
Kopsud
Sünonüümid
Malme-3M, MALME 3M, Malme-3 M, MALME.3M, Malme3M, MALME3M, Malme-3 Monolayer

Dokumendid

MALME-3M

Cell line · Toote number 305583

The MALME-3M cell line is a human melanoma model used extensively in cancer research to investigate mechanisms of melanoma progression, immune evasion, an...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

MALME-3M rakuliin on inimese melanoomi mudel, mida kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes melanoomi progresseerumise, immuunsüsteemi vältimise ja ravimresistentsuse mehhanismide uurimiseks. See rakuliin on saadud metastaatilise melanoomi kahjustusest ja näitab mitmeid agressiivse melanoomiga seotud omadusi, sealhulgas võimet ekspresseerida olulisi onkogeenseid markereid, nagu HER2, ning rolli kasvaja mikrokeskkonda mõjutamisel. MALME-3M-i hõlmavad uuringud on toonud esile selle vastuvõtlikkuse sihtterapiatele, nagu HER2-le suunatud bispetsiifilised antikehad, ning selle kasutamise T-rakkude vahendatud immunoteraapiate hindamisel.

Üks oluline MALME-3M-rakke hõlmav uurimisvaldkond on nende kasulikkus melanoomi immuunsüsteemist kõrvalehoidmise mehhanismide uurimisel. Näiteks võimaldavad MALME-3M-i ja immuunrakkude paaris kasvatamise süsteemid teadlastel uurida, kuidas melanoomi rakud moduleerivad immuunvastuseid selliste signaaliteede kaudu nagu PD-1/PD-L1 ja muud immuunkontrollpunkti inhibiitorid. Seda rakuliini on ka geneetiliselt modifitseeritud, et uurida geenihäirete mõju immuuninteraktsioonidele, mis teeb sellest väärtusliku vahendi suure läbilaskevõimega geneetiliseks sõelumiseks.

Lisaks rollile immunoloogilistes uuringutes on MALME-3M rakud olulised kasvuhormooni (GH) mõju uurimisel melanoomi progresseerumisele. Uuringud on näidanud, et GH võib suurendada ravimresistentsust ja metastaaside tekkimise potentsiaali MALME-3M rakkudes, muutes melanoomist pärinevate eksosomide koostist. Need eksosomid võivad kanda ravimresistentsust ja rändamist soodustavaid tegureid üle teistele rakkudele kasvaja mikrokeskkonnas. Sellised uuringud rõhutavad GH signaaliteede sihtimise potentsiaali terapeutilise strateegiana melanoomi kemoresistentsuse ületamiseks.

Kude
Nahk
Haigus
Melanoom
Metastaaside asukoht
Kopsud
Sünonüümid
  • Malme-3M
  • MALME 3M
  • Malme-3 M
  • MALME.3M
  • Malme3M
  • MALME3M
  • Malme-3 Monolayer

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Rakutüüp
Fibroblastide
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel

04Tunnused

Viide
MALME-3M (Cytioni katalooginumber 305583)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1438

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
HLA A2, Aw30, B13, B40(+/-), DRw7

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
IMDM, w: 4,5 g/L glükoos, w: 4 mM L-glutamiin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820800a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada keskkonda 20% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult TrypLE Expressiga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeeruda 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
43 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia