Siirry sisältöön
MALME-3M
Kudos
Iho
Sairaus
Melanooma
Metastaasikohde
Keuhkot
Synonyymit
Malme-3M, MALME 3M, Malme-3 M, MALME.3M, Malme3M, MALME3M, Malme-3 Monolayer

Asiakirjat

MALME-3M

Cell line · Tuotenumero 305583

The MALME-3M cell line is a human melanoma model used extensively in cancer research to investigate mechanisms of melanoma progression, immune evasion, an...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MALME-3M-solulinja on ihmisen melanoomamalli, jota käytetään laajasti syöpätutkimuksessa melanooman etenemisen, immuunijärjestelmän kiertämisen ja lääkeresistenssin mekanismien selvittämiseen. Tämä solulinja on peräisin metastaattisesta melanoomaleesioista, ja sillä on useita aggressiiviseen melanoomaan liittyviä ominaisuuksia, kuten kyky ilmentää keskeisiä onkogeenisiä merkkiaineita, kuten HER2:ta, sekä rooli kasvaimen mikroympäristön säätelyssä. MALME-3M:ää koskevat tutkimukset ovat korostaneet sen reagointia kohdennettuihin terapioihin, kuten HER2:ta vastaan suunnattuihin bispesifisiin vasta-aineisiin, sekä sen käyttöä T-soluista välittyvien immunoterapioiden arvioinnissa.

Yksi merkittävä MALME-3M-soluja koskeva tutkimusalue on niiden käyttö melanooman immuunivasteen kiertämisen mekanismien tutkimuksessa. Esimerkiksi MALME-3M-solujen ja immuunisolujen yhdistelmäviljelyjärjestelmät antavat tutkijoille mahdollisuuden selvittää, miten melanoomasolut säätelevät immuunivasteita PD-1/PD-L1-reittien ja muiden immuunivalvontapisteiden estäjien kautta. Tämä solulinja on myös muunnettu geneettisesti geenimuutosten vaikutusten tutkimiseksi immuunivuorovaikutuksiin, mikä tekee siitä arvokkaan työkalun suurikapasiteettiseen geneettiseen seulontaan.

Immunologisten tutkimusten lisäksi MALME-3M-solut ovat keskeisiä kasvuhormonin (GH) vaikutusten tutkimisessa melanooman etenemiseen. Tutkimukset ovat osoittaneet, että GH voi lisätä lääkeresistenssiä ja metastaattista potentiaalia MALME-3M-soluissa muuttamalla melanoomasta peräisin olevien eksosomien koostumusta. Nämä eksosomit voivat siirtää lääkeresistenssiä ja migraatiota edistäviä tekijöitä muihin soluihin kasvaimen mikroympäristössä. Tällaiset tutkimukset korostavat GH-signalointireittien kohdentamisen potentiaalia terapeuttisena strategiana melanooman kemoresistenssin voittamiseksi.

Kudos
Iho
Sairaus
Melanooma
Metastaasikohde
Keuhkot
Synonyymit
  • Malme-3M
  • MALME 3M
  • Malme-3 M
  • MALME.3M
  • Malme3M
  • MALME3M
  • Malme-3 Monolayer

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastien kaltaiset
Solutyyppi
Fibroblastit
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä

04Tunnisteet

Lähdeviite
MALME-3M (Cytion-tuotenumero 305583)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1438

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
HLA A2, Aw30, B13, B40(+/-), DRw7

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
IMDM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia, w: 3,024 g/l NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820800a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 20 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan TrypLE Express -valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen sekoita solut varovasti 10 ml:lla elatusainetta niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoi sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
3 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
43 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen