MALME-3M

A linhagem celular MALME-3M é um modelo de melanoma humano amplamente utilizado na pesquisa sobre o câncer para investigar os mecanismos de progressão do melanoma, evasão imunológica e resistência a medicamentos. Essa linha celular é derivada de uma lesão de melanoma metastático e apresenta várias características relevantes para o melanoma agressivo, incluindo sua capacidade de expressar marcadores oncogênicos-chave, como o HER2, e seu papel na modulação do microambiente tumoral. Estudos envolvendo a MALME-3M destacaram sua capacidade de resposta a terapias direcionadas, como anticorpos bispecíficos direcionados ao HER2, e seu uso na avaliação de imunoterapias mediadas por células T.

Uma área significativa de pesquisa envolvendo as células MALME-3M é sua utilidade no estudo dos mecanismos de evasão imunológica no melanoma. Por exemplo, sistemas de cocultura que combinam MALME-3M com células imunológicas permitem que os pesquisadores explorem como as células de melanoma modulam as respostas imunológicas por meio de vias como PD-1/PD-L1 e outros inibidores de pontos de controle imunológico. Essa linhagem celular também foi geneticamente modificada para estudar os efeitos de perturbações gênicas nas interações imunológicas, tornando-a uma ferramenta valiosa para triagem genética de alto rendimento.

Além de seu papel em estudos imunológicos, as células MALME-3M são fundamentais para explorar os efeitos do hormônio do crescimento (GH) na progressão do melanoma. Pesquisas demonstraram que o GH pode aumentar a resistência a medicamentos e o potencial metastático nas células MALME-3M ao alterar a composição dos exossomos derivados do melanoma. Esses exossomos podem transferir fatores de resistência a medicamentos e de promoção da migração para outras células no microambiente tumoral. Tais estudos ressaltam o potencial de direcionar as vias de sinalização do GH como estratégia terapêutica para superar a quimiorresistência do melanoma.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.