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MALME-3M
Tecido
Pele
Doença
Melanoma
Local da metástase
Pulmão
Sinónimos
Malme-3M, MALME 3M, Malme-3 M, MALME.3M, Malme3M, MALME3M, Malme-3 Monolayer

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MALME-3M

Cell line · Número do produto 305583

The MALME-3M cell line is a human melanoma model used extensively in cancer research to investigate mechanisms of melanoma progression, immune evasion, an...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular MALME-3M é um modelo de melanoma humano amplamente utilizado na investigação do cancro para estudar os mecanismos de progressão do melanoma, evasão imunitária e resistência aos medicamentos. Esta linha celular é derivada de uma lesão de melanoma metastático e apresenta várias características relevantes para o melanoma agressivo, incluindo a sua capacidade de expressar marcadores oncogénicos essenciais, como o HER2, e o seu papel na modulação do microambiente tumoral. Estudos envolvendo a MALME-3M destacaram a sua capacidade de resposta a terapias direcionadas, tais como anticorpos bispecíficos direcionados para o HER2, e a sua utilização na avaliação de imunoterapias mediadas por células T.

Uma área significativa de investigação envolvendo as células MALME-3M é a sua utilidade no estudo dos mecanismos de evasão imunitária no melanoma. Por exemplo, sistemas de cocultura que combinam MALME-3M com células imunitárias permitem aos investigadores explorar como as células de melanoma modulam as respostas imunitárias através de vias como PD-1/PD-L1 e outros inibidores de pontos de controlo imunitários. Esta linha celular também foi geneticamente modificada para estudar os efeitos de perturbações genéticas nas interações imunitárias, tornando-a uma ferramenta valiosa para o rastreio genético de alto rendimento.

Para além do seu papel em estudos imunológicos, as células MALME-3M são fundamentais na exploração dos efeitos da hormona do crescimento (GH) na progressão do melanoma. A investigação demonstrou que a GH pode aumentar a resistência aos medicamentos e o potencial metastático nas células MALME-3M, alterando a composição dos exossomas derivados do melanoma. Estes exossomas podem transferir fatores de resistência aos medicamentos e de promoção da migração para outras células no microambiente tumoral. Tais estudos sublinham o potencial de direcionar as vias de sinalização da GH como estratégia terapêutica para superar a quimiorresistência do melanoma.

Tecido
Pele
Doença
Melanoma
Local da metástase
Pulmão
Sinónimos
  • Malme-3M
  • MALME 3M
  • Malme-3 M
  • MALME.3M
  • Malme3M
  • MALME3M
  • Malme-3 Monolayer

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Tipo fibroblastos
Tipo de célula
Fibroblastos
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus

04Identificadores

Referência
MALME-3M (número de catálogo Cytion 305583)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1438

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
HLA A2, Aw30, B13, B40(+/-), DRw7

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
IMDM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-glutamina, com: 25 mM de HEPES, com: 1,0 mM de piruvato de sódio, com: 3,024 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820800a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 20% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Para frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e, para frascos T75, utilizar 5-10 ml. De seguida, cobrir completamente as células com TrypLE Express, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
3 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
43 anos
Etnia
Caucasiano