Pāriet uz saturu
MALME-3M
Audums
Āda
Slimība
Melanoma
Metastāžu vieta
Plaušas
Sinonīmi
Malme-3M, MALME 3M, Malme-3 M, MALME.3M, Malme3M, MALME3M, Malme-3 Monolayer

Dokumenti

MALME-3M

Cell line · Preces numurs 305583

The MALME-3M cell line is a human melanoma model used extensively in cancer research to investigate mechanisms of melanoma progression, immune evasion, an...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MALME-3M šūnu līnija ir cilvēka melanomas modelis, ko plaši izmanto vēža pētījumos, lai izpētītu melanomas progresēšanas mehānismus, imūnsistēmas apvedošanu un rezistenci pret zālēm. Šī šūnu līnija ir iegūta no metastātiska melanomas audzēja un izrāda vairākas agresīvai melanomai raksturīgas īpašības, tostarp spēju ekspresēt galvenos onkogēnos marķierus, piemēram, HER2, un tās lomu audzēja mikrovides modulēšanā. Pētījumos, kuros izmantota MALME-3M, ir uzsvērta tās reaģētspēja uz mērķtiecīgām terapijām, piemēram, bispecifiskām antivielām, kas vērstas pret HER2, un tās izmantošana T šūnu mediētu imūnterapiju novērtēšanā.

Viena no nozīmīgākajām pētījumu jomām, kurā izmanto MALME-3M šūnas, ir to lietderība melanomas imūnsistēmas apiešanas mehānismu izpētē. Piemēram, kopkultūras sistēmas, kurās MALME-3M tiek apvienotas ar imūnsistēmas šūnām, ļauj pētniekiem izpētīt, kā melanomas šūnas modulē imūnreakcijas, izmantojot tādus ceļus kā PD-1/PD-L1 un citus imūnsistēmas kontrolpunktu inhibitorus. Šī šūnu līnija ir arī ģenētiski modificēta, lai pētītu gēnu traucējumu ietekmi uz imūnsistēmas mijiedarbību, padarot to par vērtīgu rīku augstas caurlaidspējas ģenētiskajai skrīningai.

Papildus lomai imunoloģiskajos pētījumos, MALME-3M šūnas ir nozīmīgas, pētot augšanas hormona (GH) ietekmi uz melanomas progresēšanu. Pētījumi ir parādījuši, ka GH var palielināt zāļu rezistenci un metastāžu potenciālu MALME-3M šūnās, mainot melanomas izcelsmes eksosomu sastāvu. Šie eksosomi var pārnest zāļu rezistenci un migrāciju veicinošos faktorus uz citām šūnām audzēja mikroapvidū. Šādi pētījumi uzsver potenciālu, kas saistīts ar GH signālceļu mērķēšanu kā terapeitisko stratēģiju melanomas ķīmijterapijas rezistences pārvarēšanai.

Audums
Āda
Slimība
Melanoma
Metastāžu vieta
Plaušas
Sinonīmi
  • Malme-3M
  • MALME 3M
  • Malme-3 M
  • MALME.3M
  • Malme3M
  • MALME3M
  • Malme-3 Monolayer

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Šūnu tips
Fibroblasti
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm

04Identifikatori

Atsauce
MALME-3M (Cytion kataloga numurs 305583)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1438

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
HLA A2, Aw30, B13, B40(+/-), DRw7

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
IMDM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM nātrija piruvāta, w: 3,024 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820800a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 20% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar TrypLE Express, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
43 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis