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MALME-3M
Tessuto
La pelle
Malattia
Melanoma
Sito metastatico
Polmone
Sinonimi
Malme-3M, MALME 3M, Malme-3 M, MALME.3M, Malme3M, MALME3M, Malme-3 Monolayer

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MALME-3M

Cell line · Codice prodotto 305583

The MALME-3M cell line is a human melanoma model used extensively in cancer research to investigate mechanisms of melanoma progression, immune evasion, an...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare MALME-3M è un modello di melanoma umano ampiamente utilizzato nella ricerca sul cancro per studiare i meccanismi di progressione del melanoma, l'evasione immunitaria e la resistenza ai farmaci. Questa linea cellulare deriva da una lesione di melanoma metastatico e presenta diverse caratteristiche rilevanti per il melanoma aggressivo, tra cui la capacità di esprimere marcatori oncogenici chiave come HER2 e il suo ruolo nella modulazione del microambiente tumorale. Gli studi condotti su MALME-3M hanno evidenziato la sua risposta alle terapie mirate, come gli anticorpi bispecifici diretti contro HER2, e il suo impiego nella valutazione delle immunoterapie mediate dalle cellule T.

Un'area significativa di ricerca che coinvolge le cellule MALME-3M è la loro utilità nello studio dei meccanismi di evasione immunitaria nel melanoma. Ad esempio, i sistemi di co-coltura che accoppiano MALME-3M con cellule immunitarie consentono ai ricercatori di esplorare come le cellule di melanoma modulano le risposte immunitarie attraverso vie come PD-1/PD-L1 e altri inibitori dei checkpoint immunitari. Questa linea cellulare è stata inoltre geneticamente modificata per studiare gli effetti delle perturbazioni geniche sulle interazioni immunitarie, rendendola uno strumento prezioso per lo screening genetico ad alta produttività.

Oltre al loro ruolo negli studi immunologici, le cellule MALME-3M sono fondamentali per esplorare gli effetti dell'ormone della crescita (GH) sulla progressione del melanoma. La ricerca ha dimostrato che il GH può aumentare la resistenza ai farmaci e il potenziale metastatico nelle cellule MALME-3M alterando la composizione degli esosomi derivati dal melanoma. Questi esosomi possono trasferire la resistenza ai farmaci e i fattori che favoriscono la migrazione ad altre cellule nel microambiente tumorale. Tali studi sottolineano il potenziale di mirare alle vie di segnalazione del GH come strategia terapeutica per superare la chemioresistenza del melanoma.

Tessuto
La pelle
Malattia
Melanoma
Sito metastatico
Polmone
Sinonimi
  • Malme-3M
  • MALME 3M
  • Malme-3 M
  • MALME.3M
  • Malme3M
  • MALME3M
  • Malme-3 Monolayer

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile a un fibroblasto
Tipo di cellula
Fibroblasti
Tumorigenico
Sì, in topi nudi

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MALME-3M (codice Cytion 305583)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1438

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
HLA A2, Aw30, B13, B40(+/-), DRw7

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
IMDM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 25 mM di HEPES, w: 1,0 mM di piruvato di sodio, w: 3,024 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820800a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 20% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con TrypLE Express, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
3 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
43 anni
Etnia
Caucasico