Przejdź do treści
MALME-3M
Chusteczka
Skóra
Choroba
Czerniak
Miejsce przerzutów
Płuco
Synonimy
Malme-3M, MALME 3M, Malme-3 M, MALME.3M, Malme3M, MALME3M, Malme-3 Monolayer

Dokumenty

MALME-3M

Cell line · Numer produktu 305583

The MALME-3M cell line is a human melanoma model used extensively in cancer research to investigate mechanisms of melanoma progression, immune evasion, an...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa MALME-3M stanowi model ludzkiego czerniaka, szeroko stosowany w badaniach nad rakiem w celu analizy mechanizmów progresji czerniaka, unikania odpowiedzi immunologicznej oraz oporności na leki. Linia ta pochodzi z ogniska czerniaka z przerzutami i wykazuje szereg cech charakterystycznych dla czerniaka o agresywnym przebiegu, w tym zdolność do ekspresji kluczowych markerów onkogennych, takich jak HER2, oraz rolę w modulowaniu mikrośrodowiska nowotworowego. Badania z wykorzystaniem linii MALME-3M podkreśliły jej wrażliwość na terapie celowane, takie jak przeciwciała bispecyficzne skierowane przeciwko HER2, oraz jej przydatność w ocenie immunoterapii opartych na komórkach T.

Jednym z istotnych obszarów badań dotyczących komórek MALME-3M jest ich przydatność w badaniu mechanizmów unikania odpowiedzi immunologicznej w czerniaku. Na przykład systemy współhodowli łączące MALME-3M z komórkami odpornościowymi pozwalają badaczom zbadać, w jaki sposób komórki czerniaka modulują odpowiedzi immunologiczne poprzez szlaki takie jak PD-1/PD-L1 i inne inhibitory punktów kontrolnych układu odpornościowego. Linia komórkowa ta została również zmodyfikowana genetycznie w celu zbadania wpływu zaburzeń genetycznych na interakcje immunologiczne, co czyni ją cennym narzędziem do wysokoprzepustowego badania genetycznego.

Oprócz roli w badaniach immunologicznych komórki MALME-3M odgrywają kluczową rolę w badaniu wpływu hormonu wzrostu (GH) na progresję czerniaka. Badania wykazały, że GH może zwiększać oporność na leki i potencjał przerzutowy w komórkach MALME-3M poprzez zmianę składu egzosomów pochodzących z czerniaka. Egzosomy te mogą przenosić czynniki sprzyjające oporności na leki i migracji do innych komórek w mikrośrodowisku guza. Badania te podkreślają potencjał ukierunkowania na szlaki sygnałowe GH jako strategii terapeutycznej mającej na celu przezwyciężenie oporności czerniaka na chemioterapię.

Chusteczka
Skóra
Choroba
Czerniak
Miejsce przerzutów
Płuco
Synonimy
  • Malme-3M
  • MALME 3M
  • Malme-3 M
  • MALME.3M
  • Malme3M
  • MALME3M
  • Malme-3 Monolayer

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do fibroblastów
Typ komórki
Fibroblast
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy

04Identyfikatory

Źródło
MALME-3M (numer katalogowy Cytion 305583)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1438

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
HLA A2, Aw30, B13, B40 (+/-), DRw7

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
IMDM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM pirogronianu sodu, w: 3,024 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820800a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 20% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki preparatem TrypLE Express, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozostawić komórki do inkubacji w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut w celu ich odłączenia. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
3 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
43 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski