Pereiti prie turinio
MALME-3M
Audinys
Odos
Liga
Melanoma
Metastazių vieta
Plaučiai
Sinonimai
Malme-3M, MALME 3M, Malme-3 M, MALME.3M, Malme3M, MALME3M, Malme-3 Monolayer

Dokumentai

MALME-3M

Cell line · Prekės numeris 305583

The MALME-3M cell line is a human melanoma model used extensively in cancer research to investigate mechanisms of melanoma progression, immune evasion, an...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

MALME-3M ląstelių linija yra žmogaus melanomos modelis, plačiai naudojamas vėžio tyrimuose siekiant ištirti melanomos progresavimo, imuninės sistemos išvengimo ir atsparumo vaistams mechanizmus. Ši ląstelių linija yra gauta iš metastazuojančio melanomos židinio ir pasižymi keletu agresyviai melanomai būdingų savybių, įskaitant gebėjimą ekspresuoti pagrindinius onkogeninius žymenis, pavyzdžiui, HER2, bei vaidmenį reguliuojant naviko mikroaplinką. Tyrimai, kuriuose naudojama MALME-3M, parodė jos jautrumą tikslinėms terapijoms, pvz., bispecifiniams antikūnams, nukreiptiems prieš HER2, ir jos naudą vertinant T ląstelių tarpininkaujamas imunoterapijas.

Viena svarbi MALME-3M ląstelių tyrimų sritis yra jų naudingumas tiriant imuninio išvengimo mechanizmus melanomoje. Pavyzdžiui, bendros kultūros sistemos, kuriose MALME-3M ląstelės derinamos su imuninėmis ląstelėmis, leidžia tyrėjams tirti, kaip melanomos ląstelės moduliuoja imuninius atsakus per tokius kelius kaip PD-1/PD-L1 ir kitus imuninių kontrolės taškų inhibitorius. Ši ląstelių linija taip pat buvo genetiškai modifikuota, siekiant tirti genų sutrikimų poveikį imuninėms sąveikoms, todėl ji tapo vertinga priemone didelio našumo genetiniam atrankiniam tyrimui.

Be savo vaidmens imunologiniuose tyrimuose, MALME-3M ląstelės yra svarbios tyrinėjant augimo hormono (GH) poveikį melanomos progresavimui. Tyrimai parodė, kad GH gali padidinti vaistų atsparumą ir metastazavimo potencialą MALME-3M ląstelėse, keisdamas iš melanomos kilusių eksosomų sudėtį. Šios eksosomos gali perduoti vaistų atsparumą ir migraciją skatinančius veiksnius kitoms ląstelėms naviko mikroaplinkoje. Tokie tyrimai pabrėžia GH signalizacijos kelių taikymo potencialą kaip terapinę strategiją melanomos chemoresistencijai įveikti.

Audinys
Odos
Liga
Melanoma
Metastazių vieta
Plaučiai
Sinonimai
  • Malme-3M
  • MALME 3M
  • Malme-3 M
  • MALME.3M
  • Malme3M
  • MALME3M
  • Malme-3 Monolayer

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į fibroblastus panašus
Ląstelių tipas
Fibroblastai
Tumorogeninis
Taip, su nuogomis pelėmis

04Identifikatoriai

Nuoroda
MALME-3M (Cytion katalogo numeris 305583)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1438

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
HLA A2, Aw30, B13, B40 (+/-), DRw7

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
IMDM, w: 4,5 g/l gliukozės, w: 4 mM L-glutamino, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM natrio piruvato, w: 3,024 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820800a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 20 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tada visiškai užtepkite "TrypLE Express", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
3 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
43 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių