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MALME-3M
ティッシュ
皮膚
病気
メラノーマ
転移部位
肺
同義語
Malme-3M, MALME 3M, Malme-3 M, MALME.3M, Malme3M, MALME3M, Malme-3 Monolayer

MALME-3M

Cell line · 製品番号 305583

The MALME-3M cell line is a human melanoma model used extensively in cancer research to investigate mechanisms of melanoma progression, immune evasion, an...

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01概要

説明

MALME-3M細胞株は、メラノーマの進行、免疫回避、および薬剤耐性のメカニズムを解明するために、がん研究で広く用いられているヒトメラノーマモデルである。この細胞株は転移性メラノーマ病変から樹立されたものであり、HER2などの主要な発がんマーカーを発現する能力や、腫瘍微小環境を調節する役割など、侵攻性の高いメラノーマに関連するいくつかの特徴を示している。 MALME-3Mを用いた研究では、HER2を標的とする二重特異性抗体などの標的療法に対する反応性、およびT細胞を介した免疫療法の評価におけるその有用性が明らかになっています。

MALME-3M細胞に関する重要な研究分野の一つは、メラノーマにおける免疫回避のメカニズム解明への応用である。 例えば、MALME-3Mと免疫細胞を組み合わせた共培養システムを用いることで、研究者は、PD-1/PD-L1やその他の免疫チェックポイント阻害剤といった経路を通じて、メラノーマ細胞がどのように免疫応答を調節しているかを解明することができる。また、この細胞株は、遺伝子変異が免疫相互作用に及ぼす影響を研究するために遺伝子改変されており、ハイスループットな遺伝子スクリーニングのための貴重なツールとなっている。

免疫学的研究における役割に加え、MALME-3M細胞は、成長ホルモン(GH)がメラノーマの進行に及ぼす影響を解明する上でも重要な役割を果たしています。 研究により、GHがメラノーマ由来エクソソームの組成を変化させることで、MALME-3M細胞における薬剤耐性および転移能を増強し得ることが示されています。これらのエクソソームは、薬剤耐性や遊走促進因子を腫瘍微小環境内の他の細胞へ伝達する可能性があります。このような研究は、メラノーマの化学療法抵抗性を克服するための治療戦略として、GHシグナル伝達経路を標的とする可能性を浮き彫りにしています。

ティッシュ
皮膚
病気
メラノーマ
転移部位
肺
同義語
  • Malme-3M
  • MALME 3M
  • Malme-3 M
  • MALME.3M
  • Malme3M
  • MALME3M
  • Malme-3 Monolayer

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
線維芽細胞様
細胞の種類
線維芽細胞
腫瘍形成性
はい、ヌードマウスで

04識別子

引用
MALME-3M(Cytion カタログ番号 305583)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_1438

05発現と感受性

抗原発現
HLA A2、Aw30、B13、B40(±)、DRw7

06取り扱いと飼育

培地
IMDM, w: 4.5 g/L グルコース, w: 4 mM L-グルタミン, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM ピルビン酸ナトリウム, w: 3.024 g/L NaHCO3 (Cytion article number 820800a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に20%FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3~5ml、T75フラスコでは5~10mlのPBSを使用する。次に、TrypLE Expressで細胞を完全に覆い、T25フラスコでは1~2 ml、T75フラスコでは2.5 mlを使用する。室温で8~10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
3 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
43年
民族
白人