الانتقال إلى المحتوى
MALME-3M
الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الميلانيني
موقع الانتشار
الرئة
المرادفات
Malme-3M, MALME 3M, Malme-3 M, MALME.3M, Malme3M, MALME3M, Malme-3 Monolayer

المستندات

MALME-3M

Cell line · رقم المنتج 305583

The MALME-3M cell line is a human melanoma model used extensively in cancer research to investigate mechanisms of melanoma progression, immune evasion, an...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

يُعد خط الخلايا MALME-3M نموذجًا لسرطان الجلد البشري يُستخدم على نطاق واسع في أبحاث السرطان لدراسة آليات تطور سرطان الجلد، وتهربه من جهاز المناعة، ومقاومته للأدوية. وقد تم استخلاص هذا الخط الخلوي من آفة سرطانية منتشرة، ويُظهر العديد من الخصائص المرتبطة بسرطان الجلد العدواني، بما في ذلك قدرته على التعبير عن علامات مسرطنة رئيسية مثل HER2 ودوره في تعديل البيئة المحيطة بالورم. وقد أبرزت الدراسات التي أجريت على MALME-3M استجابته للعلاجات الموجهة، مثل الأجسام المضادة ثنائية النوع التي تستهدف HER2، واستخدامه في تقييم العلاجات المناعية التي تتوسطها الخلايا التائية.

أحد المجالات الهامة للبحث الذي يتضمن خلايا MALME-3M هو فائدتها في دراسة آليات التهرب المناعي في سرطان الجلد. على سبيل المثال، تسمح أنظمة الزراعة المشتركة التي تقرن MALME-3M بالخلايا المناعية للباحثين باستكشاف كيفية قيام خلايا سرطان الجلد بتعديل الاستجابات المناعية من خلال مسارات مثل PD-1/PD-L1 ومثبطات نقاط التفتيش المناعية الأخرى. كما تم تعديل هذا الخط الخلوي وراثياً لدراسة آثار الاضطرابات الجينية على التفاعلات المناعية، مما يجعله أداة قيّمة للفحص الجيني عالي الإنتاجية.

بالإضافة إلى دورها في الدراسات المناعية، تلعب خلايا MALME-3M دورًا أساسيًا في استكشاف تأثيرات هرمون النمو (GH) على تطور سرطان الجلد. أظهرت الأبحاث أن هرمون النمو يمكن أن يعزز مقاومة الأدوية وإمكانية الانتشار في خلايا MALME-3M عن طريق تغيير تكوين الإكسوسومات المشتقة من سرطان الجلد. يمكن لهذه الإكسوسومات نقل مقاومة الأدوية والعوامل التي تعزز الهجرة إلى خلايا أخرى في البيئة المحيطة بالورم. تؤكد مثل هذه الدراسات على إمكانية استهداف مسارات إشارات هرمون النمو كاستراتيجية علاجية للتغلب على مقاومة سرطان الجلد للعلاج الكيميائي.

الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الميلانيني
موقع الانتشار
الرئة
المرادفات
  • Malme-3M
  • MALME 3M
  • Malme-3 M
  • MALME.3M
  • Malme3M
  • MALME3M
  • Malme-3 Monolayer

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
أرومة ليفية شبيهة بالأرومة الليفية
نوع الخلية
الأرومة الليفية
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية

04المعرّفات

المرجع
MALME-3M (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305583)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1438

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
HLA A2، Aw30، B13، B40 (+/-)، DRw7

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
IMDM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 ميلي مولار جلوتامين، ث: 25 ميلي مولار هيبيس (HEPES)، ث: 1.0 ميلي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 3.024 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820800a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
استكمال الوسط ب 20٪ FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم قم بتغطية الخلايا بالكامل بمادة TrypLE Express باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
3 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
43 سنة
الأصل العرقي
قوقازي