Премини към съдържанието
MALME-3M
Тъкан
Кожа
Заболяване
Меланома
Място на метастазите
Бял дроб
Синоними
Malme-3M, MALME 3M, Malme-3 M, MALME.3M, Malme3M, MALME3M, Malme-3 Monolayer

Документи

MALME-3M

Cell line · Номер на продукта 305583

The MALME-3M cell line is a human melanoma model used extensively in cancer research to investigate mechanisms of melanoma progression, immune evasion, an...

€550.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия MALME-3M е модел на човешки меланом, широко използван в онкологичните изследвания за проучване на механизмите на прогресията на меланома, избягването на имунната система и лекарствената резистентност. Тази клетъчна линия е получена от метастатична меланомна лезия и проявява редица характеристики, характерни за агресивния меланом, включително способността ѝ да експресира ключови онкогенни маркери като HER2 и ролята ѝ в модулирането на туморната микросреда. Проучванията, включващи MALME-3M, са подчертали нейната отзивчивост към целеви терапии, като биспецифични антитела, насочени към HER2, и нейното използване при оценката на Т-клетъчно медиирани имунотерапии.

Една значителна област на изследвания, включващи MALME-3M клетки, е тяхната полезност при изучаване на механизмите на имунно избягване при меланома. Например, системи за съвместно култивиране, съчетаващи MALME-3M с имунни клетки, позволяват на изследователите да проучват как меланомните клетки модулират имунните реакции чрез пътища като PD-1/PD-L1 и други имунни инхибитори на контролните точки. Тази клетъчна линия също е генетично модифицирана за изучаване на ефектите от генни пертурбации върху имунните взаимодействия, което я прави ценен инструмент за генетичен скрининг с висока производителност.

В допълнение към ролята си в имунологичните изследвания, клетките MALME-3M са от съществено значение за проучването на ефектите на растежния хормон (GH) върху прогресията на меланома. Изследвания са показали, че GH може да повиши лекарствената резистентност и метастатичния потенциал в клетките MALME-3M, като променя състава на екзозомите, произхождащи от меланома. Тези екзозоми могат да прехвърлят фактори, способстващи лекарствената резистентност и миграцията, към други клетки в туморната микросреда. Такива изследвания подчертават потенциала на насочването към сигналните пътища на GH като терапевтична стратегия за преодоляване на химиорезистентността на меланомата.

Тъкан
Кожа
Заболяване
Меланома
Място на метастазите
Бял дроб
Синоними
  • Malme-3M
  • MALME 3M
  • Malme-3 M
  • MALME.3M
  • Malme3M
  • MALME3M
  • Malme-3 Monolayer

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на фибробласти
Тип клетка
Фибробласти
Туморогенен
Да, при голи мишки

04Идентификатори

Източник
MALME-3M (каталожен номер на Cytion 305583)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1438

05Проява и предразположеност

Експресия на антигена
HLA A2, Aw30, B13, B40(+/-), DRw7

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
IMDM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM натриев пируват, w: 3,024 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820800a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 20% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с TrypLE Express, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
3 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
43 години
Етническа принадлежност
Кавказки