Tartalomra ugrás
MALME-3M
Szövet
Bőr
Betegség
Melanoma
Áttétes hely
Tüdő
Szinonimák
Malme-3M, MALME 3M, Malme-3 M, MALME.3M, Malme3M, MALME3M, Malme-3 Monolayer

Dokumentumok

MALME-3M

Cell line · Termékszám 305583

The MALME-3M cell line is a human melanoma model used extensively in cancer research to investigate mechanisms of melanoma progression, immune evasion, an...

€550.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A MALME-3M sejtvonal egy humán melanóma-modell, amelyet a rákkutatásban széles körben alkalmaznak a melanóma progressziójának, az immunrendszer kijátszásának és a gyógyszerrezisztencia mechanizmusainak vizsgálatára. Ez a sejtvonal egy áttétes melanóma-elváltozásból származik, és az agresszív melanómára jellemző számos tulajdonsággal rendelkezik, ideértve a HER2-hez hasonló kulcsfontosságú onkogén markerek expressziójára való képességét, valamint a tumor mikrokörnyezet szabályozásában betöltött szerepét. A MALME-3M-mel kapcsolatos tanulmányok rávilágítottak a célzott terápiákra, például a HER2-t célzó bispecifikus antitestekre adott reakcióképességére, valamint a T-sejtek által közvetített immunterápiák értékelésében való felhasználására.

A MALME-3M sejtekkel kapcsolatos kutatások egyik fontos területe az immunelkerülés mechanizmusainak vizsgálata a melanómában. Például a MALME-3M-et immunsejtekkel párosító ko-kultúra rendszerek lehetővé teszik a kutatók számára, hogy feltárják, hogyan modulálják a melanoma sejtek az immunválaszokat olyan útvonalakon keresztül, mint a PD-1/PD-L1 és más immunellenőrző pont gátlók. Ezt a sejtvonalat genetikailag is módosították a génzavarok immuninterakciókra gyakorolt hatásainak tanulmányozása céljából, ami értékes eszközzé teszi a nagy áteresztőképességű genetikai szűréshez.

Az immunológiai kutatásokban betöltött szerepe mellett a MALME-3M sejtek kulcsfontosságúak a növekedési hormon (GH) melanoma progressziójára gyakorolt hatásainak feltárásában. Kutatások kimutatták, hogy a GH fokozhatja a gyógyszerrezisztenciát és a metasztatikus potenciált a MALME-3M sejtekben a melanómából származó exoszómák összetételének megváltoztatásával. Ezek az exoszómák átvihetik a gyógyszerrezisztenciát és a migrációt elősegítő tényezőket a tumor mikrokörnyezetében található más sejtekbe. Az ilyen tanulmányok aláhúzzák a GH jelátviteli útvonalak célzásának potenciálját, mint terápiás stratégiát a melanóma kemoterápiás rezisztenciájának leküzdésére.

Szövet
Bőr
Betegség
Melanoma
Áttétes hely
Tüdő
Szinonimák
  • Malme-3M
  • MALME 3M
  • Malme-3 M
  • MALME.3M
  • Malme3M
  • MALME3M
  • Malme-3 Monolayer

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Fibroblaszt-szerű
Sejttípus
Fibroblasztok
Daganatképző
Igen, meztelen egerekben

04Azonosítók

Hivatkozás
MALME-3M (Cytion katalógusszám: 305583)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1438

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
HLA A2, Aw30, B13, B40(+/-), DRw7

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
IMDM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM nátrium-piruvát, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820800a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 20% FBS-szel egészítsük ki
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen TrypLE Express-szel, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. Hagyjuk a sejteket 8-10 percig szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
3 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
43 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi