Prejsť na obsah
MALME-3M
Tkanivo
Koža
Choroba
Melanóm
Miesto metastáz
Pľúca
Synonymá
Malme-3M, MALME 3M, Malme-3 M, MALME.3M, Malme3M, MALME3M, Malme-3 Monolayer

Dokumenty

MALME-3M

Cell line · Číslo výrobku 305583

The MALME-3M cell line is a human melanoma model used extensively in cancer research to investigate mechanisms of melanoma progression, immune evasion, an...

€550.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunka MALME-3M je model ľudského melanómu, ktorý sa vo veľkej miere využíva v onkologickom výskume na skúmanie mechanizmov progresie melanómu, obchádzania imunitného systému a rezistencie voči liekom. Táto bunková línia pochádza z metastázujúceho melanómu a vykazuje viacero charakteristík typických pre agresívny melanóm, vrátane schopnosti exprimovať kľúčové onkogénne markery, ako je HER2, a jej úlohy pri modulácii mikroprostredia nádoru. Štúdie zahŕňajúce MALME-3M zdôraznili jej citlivosť na cielené terapie, ako sú bispecifické protilátky zamerané na HER2, a jej využitie pri hodnotení imunoterapií sprostredkovaných T-bunkami.

Jednou z významných oblastí výskumu zahŕňajúceho bunky MALME-3M je ich využitie pri štúdiu mechanizmov úniku pred imunitným systémom pri melanóme. Napríklad systémy spoločnej kultivácie spájajúce MALME-3M s imunitnými bunkami umožňujú výskumníkom skúmať, ako bunky melanómu modulujú imunitné reakcie prostredníctvom dráh, ako sú PD-1/PD-L1 a iné inhibítory imunitných kontrolných bodov. Táto bunková línia bola tiež geneticky modifikovaná na štúdium účinkov génových porúch na imunitné interakcie, čo z nej robí cenný nástroj pre genetické skríningy s vysokou priepustnosťou.

Okrem svojej úlohy v imunologických štúdiách sú bunky MALME-3M kľúčové pri skúmaní vplyvu rastového hormónu (GH) na progresiu melanómu. Výskum preukázal, že GH môže zvýšiť rezistenciu voči liekom a metastatický potenciál v bunkách MALME-3M tým, že mení zloženie exozómov pochádzajúcich z melanómu. Tieto exozómy môžu prenášať faktory podporujúce rezistenciu voči liekom a migráciu do iných buniek v mikroprostredí nádoru. Takéto štúdie zdôrazňujú potenciál zamerania sa na signálne dráhy GH ako terapeutickú stratégiu na prekonanie chemorezistencie melanómu.

Tkanivo
Koža
Choroba
Melanóm
Miesto metastáz
Pľúca
Synonymá
  • Malme-3M
  • MALME 3M
  • Malme-3 M
  • MALME.3M
  • Malme3M
  • MALME3M
  • Malme-3 Monolayer

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblastom podobné
Typ bunky
Fibroblasty
Tumorigenický
Áno, na nahých myšiach

04Identifikátory

Citácia
MALME-3M (katalógové číslo Cytion 305583)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1438

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
HLA A2, Aw30, B13, B40 (+/-), DRw7

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
IMDM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM pyruvátu sodného, w: 3,024 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820800a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 20 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne zakryte prípravkom TrypLE Express, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
3 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
43 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský