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MALME-3M
Pañuelo de papel
Piel
Enfermedad
Melanoma
Lugar de metástasis
Pulmón
Sinónimos
Malme-3M, MALME 3M, Malme-3 M, MALME.3M, Malme3M, MALME3M, Malme-3 Monolayer

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MALME-3M

Cell line · Número de producto 305583

The MALME-3M cell line is a human melanoma model used extensively in cancer research to investigate mechanisms of melanoma progression, immune evasion, an...

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01Información general

Descripción

La línea celular MALME-3M es un modelo de melanoma humano ampliamente utilizado en la investigación oncológica para estudiar los mecanismos de progresión del melanoma, la evasión inmunitaria y la resistencia a los fármacos. Esta línea celular se ha obtenido a partir de una lesión de melanoma metastásico y presenta varias características relevantes para el melanoma agresivo, entre ellas su capacidad para expresar marcadores oncogénicos clave, como HER2, y su papel en la modulación del microambiente tumoral. Los estudios con MALME-3M han puesto de relieve su respuesta a terapias dirigidas, como los anticuerpos biespecíficos dirigidos contra HER2, y su uso en la evaluación de inmunoterapias mediadas por células T.

Un área de investigación significativa relacionada con las células MALME-3M es su utilidad para estudiar los mecanismos de evasión inmunitaria en el melanoma. Por ejemplo, los sistemas de cocultivo que combinan MALME-3M con células inmunitarias permiten a los investigadores explorar cómo las células de melanoma modulan las respuestas inmunitarias a través de vías como PD-1/PD-L1 y otros inhibidores de puntos de control inmunitario. Esta línea celular también ha sido modificada genéticamente para estudiar los efectos de las perturbaciones genéticas en las interacciones inmunitarias, lo que la convierte en una herramienta valiosa para el cribado genético de alto rendimiento.

Además de su papel en los estudios inmunológicos, las células MALME-3M son fundamentales para explorar los efectos de la hormona del crecimiento (GH) en la progresión del melanoma. Las investigaciones han demostrado que la GH puede aumentar la resistencia a los fármacos y el potencial metastásico en las células MALME-3M al alterar la composición de los exosomas derivados del melanoma. Estos exosomas pueden transferir factores de resistencia a los fármacos y de promoción de la migración a otras células del microambiente tumoral. Estos estudios subrayan el potencial de dirigirse a las vías de señalización de la GH como estrategia terapéutica para superar la quimioresistencia del melanoma.

Pañuelo de papel
Piel
Enfermedad
Melanoma
Lugar de metástasis
Pulmón
Sinónimos
  • Malme-3M
  • MALME 3M
  • Malme-3 M
  • MALME.3M
  • Malme3M
  • MALME3M
  • Malme-3 Monolayer

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Tipo fibroblasto
Tipo de célula
Fibroblastos
Tumorigénico
Sí, en ratones desnudos

04Identificadores

Referencia
MALME-3M (número de catálogo de Cytion 305583)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1438

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de antígenos
HLA A2, Aw30, B13, B40(+/-), DRw7

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
IMDM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 25 mM de HEPES, w: 1,0 mM de piruvato sódico, w: 3,024 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820800a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 20% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con TrypLE Express, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezcle suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugue a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
3 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
43 años
Origen étnico
Caucásico