Přejít na obsah
MALME-3M
Tkáň
Kůže
Nemoc
Melanom
Místo metastázy
Plíce
Synonyma
Malme-3M, MALME 3M, Malme-3 M, MALME.3M, Malme3M, MALME3M, Malme-3 Monolayer

Dokumenty

MALME-3M

Cell line · Číslo výrobku 305583

The MALME-3M cell line is a human melanoma model used extensively in cancer research to investigate mechanisms of melanoma progression, immune evasion, an...

€550.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie MALME-3M je model lidského melanomu, který se v onkologickém výzkumu hojně využívá ke studiu mechanismů progrese melanomu, úniku před imunitním systémem a lékové rezistence. Tato buněčná linie byla izolována z metastatického ložiska melanomu a vykazuje několik charakteristik typických pro agresivní melanom, včetně schopnosti exprimovat klíčové onkogenní markery, jako je HER2, a její role při modulaci mikroprostředí nádoru. Studie zahrnující MALME-3M zdůraznily její citlivost na cílené terapie, jako jsou bispecifické protilátky zaměřené na HER2, a její využití při hodnocení imunoterapií zprostředkovaných T-buňkami.

Jednou z významných oblastí výzkumu zahrnujícího buňky MALME-3M je jejich užitečnost při studiu mechanismů imunitního úniku u melanomu. Například systémy společné kultivace kombinující MALME-3M s imunitními buňkami umožňují výzkumníkům zkoumat, jak buňky melanomu modulují imunitní reakce prostřednictvím drah, jako je PD-1/PD-L1 a dalších inhibitorů imunitních kontrolních bodů. Tato buněčná linie byla také geneticky modifikována za účelem studia účinků genových perturbací na imunitní interakce, což z ní činí cenný nástroj pro genetický screening s vysokou propustností.

Kromě své role v imunologických studiích jsou buňky MALME-3M klíčové při zkoumání účinků růstového hormonu (GH) na progresi melanomu. Výzkum prokázal, že GH může zvýšit rezistenci na léky a metastatický potenciál v buňkách MALME-3M tím, že mění složení exozomů pocházejících z melanomu. Tyto exozomy mohou přenášet faktory podporující rezistenci na léky a migraci do jiných buněk v mikroprostředí nádoru. Takové studie podtrhují potenciál zacílení na signální dráhy GH jako terapeutické strategie pro překonání chemorezistence melanomu.

Tkáň
Kůže
Nemoc
Melanom
Místo metastázy
Plíce
Synonyma
  • Malme-3M
  • MALME 3M
  • Malme-3 M
  • MALME.3M
  • Malme3M
  • MALME3M
  • Malme-3 Monolayer

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblastům podobné
Typ buňky
Fibroblasty
Tumorogenní
Ano, u nahých myší

04Identifikátory

Citace
MALME-3M (katalogové číslo Cytion 305583)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1438

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
HLA A2, Aw30, B13, B40 (±), DRw7

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
IMDM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM pyruvátu sodného, w: 3,024 g/l NaHCO3 (číslo článku Cytion 820800a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 20 % FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem TrypLE Express, a to 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
3 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
43 let
Etnická příslušnost
Kavkazský