Skip to content
MALME-3M
Tissue
ผิวหนัง
Disease
เมลาโนมา
Metastatic site
ปอด
Synonyms
Malme-3M, MALME 3M, Malme-3 M, MALME.3M, Malme3M, MALME3M, Malme-3 Monolayer

Documents

MALME-3M

Cell line · Product number 305583

The MALME-3M cell line is a human melanoma model used extensively in cancer research to investigate mechanisms of melanoma progression, immune evasion, an...

€550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ MALME-3M เป็นแบบจำลองมะเร็งผิวหนังของมนุษย์ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยมะเร็งเพื่อศึกษาวิถีการเจริญเติบโตของมะเร็งผิวหนัง การหลบเลี่ยงระบบภูมิคุ้มกัน และความต้านทานต่อยา สายเซลล์นี้ได้มาจากรอยโรคมะเร็งผิวหนังที่แพร่กระจายและแสดงลักษณะหลายประการที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งผิวหนังที่ก้าวร้าว รวมถึงความสามารถในการแสดงเครื่องหมายออนโคเจนิกที่สำคัญ เช่น HER2 และบทบาทในการปรับสภาพแวดล้อมจุลภาคของเนื้องอก การศึกษาที่เกี่ยวข้องกับ MALME-3M ได้เน้นย้ำถึงความไวต่อการรักษาแบบมุ่งเป้า เช่น แอนติบอดีชนิดสองสายที่มุ่งเป้า HER2 และการใช้ในการประเมินภูมิคุ้มกันบำบัดที่ผ่านกลไกของเซลล์ T

หนึ่งในด้านสำคัญของการวิจัยที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ MALME-3M คือประโยชน์ของเซลล์เหล่านี้ในการศึกษาวิถีการหลบเลี่ยงการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันในมะเร็งผิวหนังเมลาโนมา ตัวอย่างเช่น ระบบเพาะเลี้ยงร่วมที่จับคู่ MALME-3M กับเซลล์ภูมิคุ้มกันช่วยให้นักวิจัยสามารถสำรวจวิธีที่เซลล์เมลาโนมาปรับเปลี่ยนการตอบสนองของภูมิคุ้มกันผ่านเส้นทางเช่น PD-1/PD-L1 และตัวยับยั้งจุดตรวจภูมิคุ้มกันอื่น ๆ สายเซลล์นี้ยังได้รับการดัดแปลงพันธุกรรมเพื่อศึกษาผลกระทบของการรบกวนทางพันธุกรรมต่อการโต้ตอบของภูมิคุ้มกัน ทำให้เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าสำหรับการคัดกรองทางพันธุกรรมแบบปริมาณสูง

นอกเหนือจากบทบาทในการศึกษาทางภูมิคุ้มกันแล้ว เซลล์ MALME-3M ยังมีบทบาทสำคัญในการสำรวจผลกระทบของฮอร์โมนการเจริญเติบโต (GH) ต่อการลุกลามของมะเร็งผิวหนังเมลาโนมา งานวิจัยได้แสดงให้เห็นว่า GH สามารถเพิ่มความต้านทานต่อยาและศักยภาพในการแพร่กระจายของเซลล์ MALME-3M โดยการเปลี่ยนองค์ประกอบของเอ็กโซโซมที่มาจากเมลาโนมา เอ็กโซโซมเหล่านี้สามารถถ่ายทอดปัจจัยที่ส่งเสริมความต้านทานต่อยาและการเคลื่อนที่ไปยังเซลล์อื่นๆ ในสภาพแวดล้อมจุลภาคของเนื้องอก การศึกษาดังกล่าวเน้นย้ำถึงศักยภาพของการมุ่งเป้าไปที่เส้นทางสัญญาณของ GH เป็นกลยุทธ์การรักษาเพื่อเอาชนะความต้านทานต่อเคมีบำบัดในเมลาโนมา

Tissue
ผิวหนัง
Disease
เมลาโนมา
Metastatic site
ปอด
Synonyms
  • Malme-3M
  • MALME 3M
  • Malme-3 M
  • MALME.3M
  • Malme3M
  • MALME3M
  • Malme-3 Monolayer

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายไฟโบรบลาสต์
Cell type
ไฟโบรบลาสต์
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน

04Identifiers

Citation
MALME-3M (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305583)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1438

05Expression and susceptibility

Antigen expression
HLA A2, Aw30, B13, B40(+/-), DRw7

06Handling and culture

Culture medium
IMDM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 25 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 3.024 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820800a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 20%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย TrypLE Express โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (g) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเลี้ยงเซลล์ใหม่ที่บรรจุอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
3 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
43 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน