Ga naar de inhoud
MALME-3M
Weefsel
Huid
Ziekte
Melanoom
Plaats van uitzaaiingen
Long
Synoniemen
Malme-3M, MALME 3M, Malme-3 M, MALME.3M, Malme3M, MALME3M, Malme-3 Monolayer

Documenten

MALME-3M

Cell line · Productnummer 305583

The MALME-3M cell line is a human melanoma model used extensively in cancer research to investigate mechanisms of melanoma progression, immune evasion, an...

€550.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De MALME-3M-cellijn is een menselijk melanoommodel dat op grote schaal wordt gebruikt in kankeronderzoek om de mechanismen van melanoomprogressie, immuunontwijking en geneesmiddelresistentie te bestuderen. Deze cellijn is afkomstig van een gemetastaseerde melanoomlaesie en vertoont verschillende kenmerken die relevant zijn voor agressief melanoom, waaronder het vermogen om belangrijke oncogene markers zoals HER2 tot expressie te brengen en de rol ervan bij het beïnvloeden van de tumor-micro-omgeving. Studies met MALME-3M hebben de responsiviteit ervan op gerichte therapieën, zoals bispecifieke antilichamen gericht tegen HER2, en het gebruik ervan bij de evaluatie van door T-cellen gemedieerde immuuntherapieën benadrukt.

Een belangrijk onderzoeksgebied met betrekking tot MALME-3M-cellen is hun nut bij het bestuderen van de mechanismen van immuunontwijking bij melanoom. Zo stellen co-cultuursystemen waarin MALME-3M wordt gekoppeld aan immuuncellen onderzoekers in staat te onderzoeken hoe melanoomcellen immuunreacties moduleren via routes zoals PD-1/PD-L1 en andere immuuncheckpointremmers. Deze cellijn is ook genetisch gemodificeerd om de effecten van genverstoringen op immuuninteracties te bestuderen, waardoor het een waardevol hulpmiddel is voor genetische screening met hoge doorvoer.

Naast hun rol in immunologische studies zijn MALME-3M-cellen van cruciaal belang voor het onderzoek naar de effecten van groeihormoon (GH) op de progressie van melanoom. Onderzoek heeft aangetoond dat GH de resistentie tegen geneesmiddelen en het metastatisch potentieel in MALME-3M-cellen kan versterken door de samenstelling van uit melanoom afkomstige exosomen te veranderen. Deze exosomen kunnen resistentie tegen geneesmiddelen en migratiebevorderende factoren overbrengen naar andere cellen in de tumor-micro-omgeving. Dergelijke studies onderstrepen het potentieel van het richten op GH-signaalroutes als therapeutische strategie voor het overwinnen van chemoresistentie bij melanoom.

Weefsel
Huid
Ziekte
Melanoom
Plaats van uitzaaiingen
Long
Synoniemen
  • Malme-3M
  • MALME 3M
  • Malme-3 M
  • MALME.3M
  • Malme3M
  • MALME3M
  • Malme-3 Monolayer

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast-achtige
Celtype
Fibroblast
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
MALME-3M (Cytion-catalogusnummer 305583)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1438

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
HLA A2, Aw30, B13, B40(+/-), DRw7

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
IMDM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820800a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 20% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met TrypLE Express, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Meng de cellen na incubatie voorzichtig met 10 ml medium om ze te resuspenderen en centrifugeer vervolgens gedurende 3 minuten bij 300xg. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
3 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
43 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch