NRK-Pom121-EGFP3

La lignée cellulaire NRK-Pom121-EGFP3 est dérivée de cellules rénales normales de rat (NRK) et a été génétiquement modifiée pour exprimer la protéine de fusion Pom121-EGFP3. Pom121 est une nucléoporine transmembranaire qui fait partie intégrante du complexe des pores nucléaires (NPC) et joue un rôle crucial dans l’assemblage de l’enveloppe nucléaire et le fonctionnement du NPC. L’ajout du marqueur « protéine fluorescente verte améliorée » (EGFP3) facilite la visualisation et l’étude de la dynamique, de la localisation et des interactions de Pom121 au sein de cellules vivantes par microscopie à fluorescence. Cela fait de la lignée cellulaire NRK-Pom121-EGFP3 un outil précieux pour l’étude des mécanismes de transport nucléaire et de l’architecture du NPC.

Les cellules NRK, lignée parente de la lignée NRK-Pom121-EGFP3, sont couramment utilisées dans diverses applications de recherche en raison de leurs caractéristiques de croissance stables et de leur morphologie épithéliale. La modification visant à exprimer Pom121-EGFP3 offre aux chercheurs un modèle robuste pour examiner les mécanismes moléculaires sous-jacents au transport nucléocytoplasmique, l’organisation structurelle du NPC et sa régulation au cours de la division et de la différenciation cellulaires. De plus, cette lignée cellulaire peut servir à étudier les effets de diverses perturbations génétiques et pharmacologiques sur la fonction du NPC, offrant ainsi des perspectives sur les maladies associées à des anomalies du transport nucléaire, telles que le cancer et les troubles neurodégénératifs.

Dans l’ensemble, la lignée cellulaire NRK-Pom121-EGFP3 constitue un outil sophistiqué en biologie cellulaire et en recherche moléculaire, fournissant des informations de haute résolution sur les processus dynamiques régissant les interactions nucléo-cytoplasmiques. Sa capacité à permettre l’observation en temps réel des composants du NPC dans un contexte cellulaire vivant en fait un outil inestimable pour faire progresser notre compréhension des mécanismes de transport cellulaire et de leurs implications pour la santé et la maladie.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.