NRK-Pom121-EGFP3

NRK-Pom121-EGFP3-solulinja on peräisin normaaleista rotan munuaissoluista (NRK), ja se on geneettisesti muunnettu ilmentämään Pom121-EGFP3-fuusioproteiinia. Pom121 on transmembraaninen nukleoporiini, joka on ydinhuokoskompleksin (NPC) olennainen osa ja jolla on ratkaiseva rooli ydinkuoren kokoamisessa ja NPC:n toiminnassa. Tehostetun vihreän fluoresoivan proteiinin (EGFP3) tagin sisällyttäminen helpottaa Pom121:n dynamiikan, lokalisoinnin ja vuorovaikutusten visualisointia ja tutkimista elävissä soluissa fluoresenssimikroskopian avulla. Tämä tekee NRK-Pom121-EGFP3-solulinjasta arvokkaan välineen ydinkuljetusmekanismien ja NPC-arkkitehtuurin tutkimiseen.

NRK-Pom121-EGFP3-solulinjan vanhempien NRK-soluja käytetään yleisesti erilaisissa tutkimussovelluksissa niiden vakaiden kasvuominaisuuksien ja epiteelimorfologian vuoksi. Pom121-EGFP3:n ilmentämiseen tehty muunnos tarjoaa tutkijoille vankan mallin, jonka avulla voidaan tutkia nukleosytoplasmisen kuljetuksen taustalla olevia molekyylimekanismeja, NPC:n rakenteellista organisaatiota ja sen säätelyä solun jakautumisen ja erilaistumisen aikana. Lisäksi tätä solulinjaa voidaan käyttää erilaisten geneettisten ja farmakologisten häiriöiden vaikutusten tutkimiseen NPC:n toimintaan, mikä tarjoaa tietoa sairauksista, jotka liittyvät ydinkuljetusvirheisiin, kuten syöpään ja neurodegeneratiivisiin häiriöihin.

Kaiken kaikkiaan NRK-Pom121-EGFP3-solulinja edustaa kehittynyttä solubiologian ja molekyylitutkimuksen välinettä, joka tarjoaa korkean resoluution näkemyksiä dynaamisista prosesseista, jotka ohjaavat nukleosytoplasman vuorovaikutusta. Sen kyky mahdollistaa NPC-komponenttien reaaliaikainen havainnointi elävässä solukontekstissa tekee siitä korvaamattoman arvokkaan, kun pyritään edistämään ymmärrystä solujen kuljetusmekanismeista ja niiden vaikutuksista terveyteen ja sairauksiin.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa