Skip to content
NRK-Pom121-EGFP3
Tissue
Thận
Synonyms
NRK Pom121-EGFP3, NRK Pom121-3EGFP, NRK-Pom121-3EGFP

Documents

NRK-Pom121-EGFP3

Cell line · Product number 500669

The NRK-Pom121-EGFP3 cell line is derived from normal rat kidney (NRK) cells and is genetically engineered to express the Pom121-EGFP3 fusion protein. Pom...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Made to order
1

01General information

Description

Dòng tế bào NRK-Pom121-EGFP3 được phát triển từ tế bào thận bình thường của chuột (NRK) và được biến đổi gen để biểu hiện protein liên hợp Pom121-EGFP3. Pom121 là một protein xuyên màng thuộc nhóm nucleoporin, là thành phần thiết yếu của phức hợp lỗ hạt nhân (NPC), đóng vai trò quan trọng trong quá trình lắp ráp màng hạt nhân và chức năng của NPC. Việc tích hợp thẻ protein huỳnh quang xanh lá cây tăng cường (EGFP3) giúp quan sát và nghiên cứu động học, vị trí và tương tác của Pom121 trong tế bào sống thông qua kính hiển vi huỳnh quang. Điều này khiến dòng tế bào NRK-Pom121-EGFP3 trở thành công cụ quý giá để nghiên cứu cơ chế vận chuyển nhân và cấu trúc NPC.

Tế bào NRK, dòng tế bào gốc của NRK-Pom121-EGFP3, thường được sử dụng trong các ứng dụng nghiên cứu khác nhau nhờ đặc tính tăng trưởng ổn định và hình thái biểu mô. Việc sửa đổi để biểu hiện Pom121-EGFP3 cung cấp cho các nhà nghiên cứu một mô hình mạnh mẽ để khám phá các cơ chế phân tử cơ bản của vận chuyển nhân-chất lỏng, tổ chức cấu trúc của NPC và sự điều hòa của nó trong quá trình phân chia và biệt hóa tế bào. Ngoài ra, dòng tế bào này có thể được sử dụng để nghiên cứu tác động của các can thiệp di truyền và dược lý khác nhau đối với chức năng NPC, cung cấp những hiểu biết về các bệnh liên quan đến rối loạn vận chuyển nhân, như ung thư và các rối loạn thoái hóa thần kinh.

Tổng thể, dòng tế bào NRK-Pom121-EGFP3 đại diện cho một công cụ tiên tiến trong sinh học tế bào và nghiên cứu phân tử, cung cấp những hiểu biết chi tiết về các quá trình động học điều khiển tương tác nhân-chất lỏng. Khả năng quan sát các thành phần NPC trong bối cảnh tế bào sống theo thời gian thực khiến nó trở nên vô giá trong việc nâng cao hiểu biết về cơ chế vận chuyển tế bào và tác động của chúng đối với sức khỏe và bệnh tật.

Tissue
Thận
Synonyms
  • NRK Pom121-EGFP3
  • NRK Pom121-3EGFP
  • NRK-Pom121-3EGFP

02Classification

Organism
Rat
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào giống fibroblast có hình dạng fusiform

04Identifiers

Citation
NRK-Pom121-EGFP3 (Số catalog của Cytion: 500669)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_AV96
Depositor
Phòng thí nghiệm Ellenberg (EMBL)

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGF), hoạt tính kích thích nhân lên (MSA)
Protein expression
Pom121-EGFP3: Vị trí/Gen: 1..589 / Pcmv, 653..4250 / Pom121, 4251..4287 / null, 4318..6546 / 3EGFP, 7780..8574 / KanR/NeoR
Products
Yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGF), Hoạt tính kích thích nhân lên (MSA), POM121, Protein xuyên màng, Nucleoporin, Promotor CMV, Neomycin, Phosphotransferase

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò phôi (FBS) và 0,5 mg/mL G418
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường cũ và rửa tế bào bằng PBS. Thêm dung dịch trypsin 0,025%/EDTA 0,02% mới pha, đã được làm nóng đến 37 độ Celsius, và chờ cho đến khi tế bào tách ra, thường mất khoảng 5 phút. Trung hòa trypsin bằng cách thêm môi trường tươi, sau đó chuyển hỗn hợp tế bào vào ống và ly tâm. Sau khi ly tâm, loại bỏ dịch trên, tái phân tán cặn tế bào trong môi trường nuôi cấy tươi và chuyển hỗn hợp vào bình mới. Thêm G418 vào môi trường nuôi cấy để đạt nồng độ cuối cùng 0,5 mg/ml
Seeding density
2 đến 4 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
Osborne Mendel