NRK-Pom121-EGFP3
Cell line · Termékszám 500669
Az NRK-Pom121-EGFP3 sejtvonal normál patkányvese-sejtekből (NRK) származik, és genetikailag úgy módosították, hogy a Pom121-EGFP3 fúziós fehérjét expresszálja. Pom...
Személyre szabás / Ajánlások
- NRK-Pom121-EGFP3Cell line€800.00
01Általános információk
- Leírás
Az NRK-Pom121-EGFP3 sejtvonal normál patkányvese (NRK) sejtekből származik, és genetikailag úgy alakították ki, hogy a Pom121-EGFP3 fúziós fehérjét expresszálja. A Pom121 egy transzmembrán nukleoporin, amely a nukleáris póruskomplex (NPC) integráns összetevője, és döntő szerepet játszik a nukleáris burkolás összeszerelésében és az NPC működésében. A fokozott zöld fluoreszcens fehérje (EGFP3) tag beillesztése megkönnyíti a Pom121 dinamikájának, lokalizációjának és kölcsönhatásainak láthatóvá tételét és tanulmányozását élő sejteken belül fluoreszcens mikroszkópia segítségével. Ezáltal az NRK-Pom121-EGFP3 sejtvonal értékes eszközzé válik a nukleáris transzportmechanizmusok és az NPC architektúra vizsgálatához.
Az NRK-Pom121-EGFP3 szülői vonalát, az NRK-Pom121-EGFP3 sejteket stabil növekedési jellemzőik és epiteliális morfológiájuk miatt gyakran használják különböző kutatási alkalmazásokban. A Pom121-EGFP3 expresszálására történő módosítás robusztus modellt biztosít a kutatók számára a nukleocitoplazmatikus transzport alapjául szolgáló molekuláris mechanizmusok, az NPC strukturális szerveződése, valamint a sejtosztódás és differenciálódás során történő szabályozásának vizsgálatához. Emellett ez a sejtvonal felhasználható a különböző genetikai és farmakológiai perturbációk NPC funkcióra gyakorolt hatásának tanulmányozására, betekintést nyújtva a nukleáris transzport hibáival összefüggő betegségekbe, mint például a rák és a neurodegeneratív rendellenességek.
Összességében az NRK-Pom121-EGFP3 sejtvonal a sejtbiológia és a molekuláris kutatás kifinomult eszköze, amely nagy felbontású betekintést nyújt a nukleocitoplazmatikus kölcsönhatásokat szabályozó dinamikus folyamatokba. Az a képessége, hogy lehetővé teszi az NPC komponensek valós idejű megfigyelését élő sejtkörnyezetben, felbecsülhetetlenné teszi a sejtek transzportmechanizmusainak és azok egészségre és betegségekre gyakorolt hatásának megértésében.
- Szövet
- Vese
- Szinonimák
- NRK Pom121-EGFP3
- NRK Pom121-3EGFP
- NRK-Pom121-3EGFP
02Osztályozás
- Organizmus
- Patkány
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Morfológia
- Fibroblaszt-szerű, fusiform alakú sejtek
04Azonosítók
- Hivatkozás
- NRK-Pom121-EGFP3 (Cytion katalógusszám: 500669)
- NCBI adóazonosító szám
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_AV96
- Betétes
- Az Ellenberg Labor (EMBL)
05Kifejeződés és fogékonyság
- Kifejeződő receptorok
- Epidermális növekedési faktor (EGF), szaporodást serkentő aktivitás (MSA)
- Fehérjeexpresszió
- Pom121-EGFP3: Hely/gén: 1..589 / Pcmv, 653..4250 / Pom121, 4251..4287 / null, 4318..6546 / 3EGFP, 7780..8574 / KanR/NeoR
- Termékek
- Epidermális növekedési faktor (EGF), szaporodást serkentő aktivitás (MSA), POM121, transzmembrán, nukleoporin, CMV promotor, neomicin, foszfotranszferáz
06Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel, 0,5 mg/ml G418-zal
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Dobja ki a régi tápfolyadékot, és mossa ki a sejteket PBS-szel. Adjunk hozzá frissen készített 0,025%-os tripszin/0,02%-os EDTA oldatot 37 Celsius-fokra melegítve, és várjuk meg, amíg a sejtek leválnak, ami általában körülbelül 5 percig tart. Semlegesítse a tripszint friss tápfolyadék hozzáadásával, majd helyezze át a sejtkeveréket egy csőbe és centrifugálja. A centrifugálás után távolítsa el a felülúszót, reszuszpendálja a sejtpelletet friss táptalajban, és a szuszpenziót helyezze át új lombikba. Adjunk a táptalajhoz G418-at, hogy 0,5 mg/ml végkoncentrációt érjünk el
- Ültetési sűrűség
- 2–4 x 104 sejt/cm2
- Folyadékcsere
- hetente 2-3 alkalommal
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
08Adományozó
- Faj / alfaj
- OsborneMendel
09Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Jogi nyilatkozat
- Sejtjeinket kizárólag in vitro laboratóriumi kutatási célokra bocsátjuk rendelkezésre, és nem szánjuk klinikai vagy diagnosztikai felhasználásra, nem adhatóak be embereknek, és nem használhatók fel állatorvosi célokra. A felhasználóknak be kell tartaniuk a sejtek kutatási környezetben történő kezelésére és felhasználására vonatkozó valamennyi vonatkozó irányelvet és előírást.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Harmadik felekkel kötött megállapodások érvényesek
- Igen
.jpg)