NRK-Pom121-EGFP3
Cell line · Toote number 500669
Rakuliin NRK-Pom121-EGFP3 on saadud normaalsetest roti neerurakkudest (NRK) ja on geneetiliselt muundatud nii, et see ekspresseerib Pom121-EGFP3-fusioonvalku. Pom...
Kohandamine / Soovitused
- NRK-Pom121-EGFP3Cell line€800.00
01Üldine teave
- Kirjeldus
NRK-Pom121-EGFP3 rakuliin on saadud normaalsetest roti neerurakkudest (NRK) ja on geneetiliselt muundatud, et ekspresseerida Pom121-EGFP3 fusioonvalku. Pom121 on transmembraanne nukleoporiin, mis on tuumapoorikompleksi (NPC) lahutamatu osa, millel on oluline roll tuumakesta kokkupanekul ja NPC funktsioonis. Tugevdatud rohelise fluorestseeruva valgu (EGFP3) lisamine hõlbustab Pom121 dünaamika, lokaliseerimise ja interaktsioonide visualiseerimist ja uurimist elusrakus fluorestsentsmikroskoopia abil. See muudab NRK-Pom121-EGFP3 rakuliini väärtuslikuks vahendiks tuuma transpordimehhanismide ja NPC arhitektuuri uurimiseks.
NRK-Pom121-EGFP3 vanemliin NRK-Pom121-EGFP3 on tänu oma stabiilsetele kasvuomadustele ja epiteeli morfoloogiale üldkasutatav mitmesugustes teadusuuringutes. Pom121-EGFP3 ekspressiooni muutmine annab teadlastele tugeva mudeli, et uurida nukleotsütoplasma transpordi aluseks olevaid molekulaarmehhanisme, NPC struktuurilist korraldust ja selle regulatsiooni rakkude jagunemise ja diferentseerumise ajal. Lisaks saab seda rakuliini kasutada erinevate geneetiliste ja farmakoloogiliste häirete mõju uurimiseks NPC funktsioonile, mis annab ülevaate tuuma transpordi defektidega seotud haigustest, nagu vähk ja neurodegeneratiivsed häired.
Kokkuvõttes on NRK-Pom121-EGFP3 rakuliin keerukas vahend rakubioloogias ja molekulaaruuringutes, mis annab kõrge resolutsiooniga ülevaate tuumasütoplasma interaktsioone reguleerivatest dünaamilistest protsessidest. Selle võime võimaldada NPC komponentide reaalajas jälgimist elusraku kontekstis muudab selle asendamatuks, et edendada meie arusaamist rakutranspordi mehhanismidest ja nende mõjust tervisele ja haigustele.
- Kude
- Neerud
- Sünonüümid
- NRK Pom121-EGFP3
- NRK Pom121-3EGFP
- NRK-Pom121-3EGFP
02Klassifikatsioon
- Organism
- Rott
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Fibroblastitaolised fusiformse kujuga rakud
04Tunnused
- Viide
- NRK-Pom121-EGFP3 (Cytioni katalooginumber 500669)
- NCBI maksukood
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_AV96
- Hoiustaja
- Ellenbergi labor (EMBL)
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Ekspresseeritud retseptorid
- Epidermise kasvufaktor (EGF), paljunemist stimuleeriv toime (MSA)
- Valgu ekspressioon
- Pom121-EGFP3: Asukoht/geen: 1..589 / Pcmv, 653..4250 / Pom121, 4251..4287 / null, 4318..6546 / 3EGFP, 7780..8574 / KanR/NeoR
- Tooted
- Epidermise kasvufaktor (EGF), paljunemist stimuleeriv aktiivsus (MSA), POM121, transmembraan, nukleoporiin, CMV promotor, neomütsiin, fosfotransferaas
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS, 0,5 mg/ml G418-ga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Visake vana söötme ära ja peske rakud PBSiga. Lisage värskelt valmistatud 0,025% trüpsiini/0,02% EDTA lahust, mida on kuumutatud 37 kraadini, ja oodake, kuni rakud eralduvad, mis tavaliselt võtab umbes 5 minutit. Neutraliseerige trüpsiin, lisades värsket keskkonda, seejärel viige rakusegu katseklaasi ja tsentrifuugige. Pärast tsentrifuugimist eemaldage supernatant, resuspenseerige rakupellet värskes söötmes ja viige suspensioon uutesse kolvidesse. Lisage G418 kultuurikeskkonda, et saavutada lõppkontsentratsioon 0,5 mg/ml
- Külvitihedus
- 2 kuni 4 x 104 rakku/cm2
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Tõug / alamliik
- OsborneMendel
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Vastutuse välistamine
- Meie rakud on ette nähtud üksnes in vitro laboratoorseks uurimistööks ning need ei ole mõeldud kliiniliseks või diagnostiliseks kasutamiseks, samuti ei tohi neid manustada inimestele ega kasutada veterinaarsetel eesmärkidel. Kasutajad peavad järgima kõiki kohaldatavaid suuniseid ja eeskirju nende rakkude käitlemise ja kasutamise kohta teadusuuringutes.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Kehtivad kolmandate osapooltega sõlmitud lepingud
- Jah
.jpg)