NRK-Pom121-EGFP3

La linea cellulare NRK-Pom121-EGFP3 deriva da cellule normali di rene di ratto (NRK) ed è geneticamente ingegnerizzata per esprimere la proteina di fusione Pom121-EGFP3. Pom121 è una nucleoporina transmembrana che è una componente integrale del complesso del poro nucleare (NPC) e svolge un ruolo cruciale nell'assemblaggio dell'involucro nucleare e nella funzione dell'NPC. L'inclusione del tag EGFP3 (enhanced green fluorescent protein) facilita la visualizzazione e lo studio della dinamica, della localizzazione e delle interazioni di Pom121 all'interno di cellule vive attraverso la microscopia a fluorescenza. Ciò rende la linea cellulare NRK-Pom121-EGFP3 uno strumento prezioso per studiare i meccanismi di trasporto nucleare e l'architettura delle NPC.

Le cellule NRK, la linea parentale di NRK-Pom121-EGFP3, sono comunemente utilizzate in varie applicazioni di ricerca grazie alle loro caratteristiche di crescita stabile e alla morfologia epiteliale. La modifica per esprimere Pom121-EGFP3 fornisce ai ricercatori un modello robusto per esaminare i meccanismi molecolari alla base del trasporto nucleocitoplasmatico, l'organizzazione strutturale della NPC e la sua regolazione durante la divisione e il differenziamento cellulare. Inoltre, questa linea cellulare può essere utilizzata per studiare gli effetti di varie perturbazioni genetiche e farmacologiche sulla funzione della NPC, offrendo spunti di riflessione sulle malattie associate a difetti del trasporto nucleare, come il cancro e i disturbi neurodegenerativi.

Nel complesso, la linea cellulare NRK-Pom121-EGFP3 rappresenta uno strumento sofisticato per la biologia cellulare e la ricerca molecolare, in quanto fornisce approfondimenti ad alta risoluzione sui processi dinamici che regolano le interazioni nucleocitoplasmatiche. La sua capacità di consentire l'osservazione in tempo reale dei componenti della NPC in un contesto cellulare vivo la rende preziosa per far progredire la nostra comprensione dei meccanismi di trasporto cellulare e delle loro implicazioni nella salute e nella malattia.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia