NRK-Pom121-EGFP3

La línea celular NRK-Pom121-EGFP3 se deriva de células renales normales de rata (NRK) y ha sido modificada genéticamente para expresar la proteína de fusión Pom121-EGFP3. Pom121 es una nucleoporina transmembrana que forma parte integral del complejo de poros nucleares (NPC) y desempeña un papel crucial en el ensamblaje de la envoltura nuclear y en la función del NPC. La incorporación de la etiqueta de proteína fluorescente verde mejorada (EGFP3) facilita la visualización y el estudio de la dinámica, la localización y las interacciones de Pom121 dentro de las células vivas mediante microscopía de fluorescencia. Esto convierte a la línea celular NRK-Pom121-EGFP3 en una herramienta valiosa para investigar los mecanismos de transporte nuclear y la arquitectura del NPC.

Las células NRK, la línea parental de NRK-Pom121-EGFP3, se utilizan comúnmente en diversas aplicaciones de investigación debido a sus características de crecimiento estable y su morfología epitelial. La modificación para expresar Pom121-EGFP3 brinda a los investigadores un modelo sólido para examinar los mecanismos moleculares que subyacen al transporte nucleocitoplasmático, la organización estructural del NPC y su regulación durante la división y diferenciación celular. Además, esta línea celular puede utilizarse para estudiar los efectos de diversas perturbaciones genéticas y farmacológicas sobre la función del NPC, lo que ofrece información sobre enfermedades asociadas a defectos en el transporte nuclear, como el cáncer y los trastornos neurodegenerativos.

En general, la línea celular NRK-Pom121-EGFP3 representa una herramienta sofisticada en biología celular e investigación molecular, que brinda información de alta resolución sobre los procesos dinámicos que rigen las interacciones nucleocitoplasmáticas. Su capacidad para permitir la observación en tiempo real de los componentes del NPC en un contexto celular vivo la convierte en una herramienta invaluable para avanzar en nuestra comprensión de los mecanismos de transporte celular y sus implicaciones en la salud y la enfermedad.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.