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NRK-Pom121-EGFP3
Tissue
肾脏
Synonyms
NRK Pom121-EGFP3, NRK Pom121-3EGFP, NRK-Pom121-3EGFP

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NRK-Pom121-EGFP3

Cell line · Product number 500669

The NRK-Pom121-EGFP3 cell line is derived from normal rat kidney (NRK) cells and is genetically engineered to express the Pom121-EGFP3 fusion protein. Pom...

US$800.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

NRK-Pom121-EGFP3细胞系来源于正常大鼠肾脏(NRK)细胞,经基因工程改造可表达Pom121-EGFP3融合蛋白。Pom121 是一种跨膜核蛋白,是核孔复合体(NPC)的重要组成部分,在核膜组装和 NPC 功能中发挥着关键作用。加入增强型绿色荧光蛋白(EGFP3)标签有助于通过荧光显微镜观察和研究 Pom121 在活细胞内的动态、定位和相互作用。这使得 NRK-Pom121-EGFP3 细胞系成为研究核转运机制和 NPC 结构的重要工具。

NRK-Pom121-EGFP3 的亲本系 NRK 细胞因其稳定的生长特性和上皮形态而常用于各种研究应用。表达 Pom121-EGFP3 的改造为研究人员提供了一个强大的模型,用于研究核胞质转运的分子机制、NPC 的结构组织及其在细胞分裂和分化过程中的调控。此外,这种细胞系还可用于研究各种遗传和药物扰动对 NPC 功能的影响,为研究癌症和神经退行性疾病等与核转运缺陷有关的疾病提供深入的见解。

总之,NRK-Pom121-EGFP3 细胞系是细胞生物学和分子研究领域的一种先进工具,能让人们高分辨率地了解核胞质相互作用的动态过程。它能够在活细胞环境中实时观察核细胞质成分,这使它在促进我们对细胞转运机制及其对健康和疾病的影响的理解方面具有非常重要的价值。

Tissue
肾脏
Synonyms
  • NRK Pom121-EGFP3
  • NRK Pom121-3EGFP
  • NRK-Pom121-3EGFP

02Classification

Organism
Rat
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
纺锤形纤维母细胞

04Identifiers

Citation
NRK-Pom121-EGFP3(Cytion 目录号 500669)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_AV96
Depositor
艾伦伯格实验室(EMBL)

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
表皮生长因子(EGF),增殖刺激活性(MSA)
Protein expression
Pom121-EGFP3:位置/基因:1...589 / Pcmv, 653...4250 / Pom121, 4251...4287 / null, 4318...6546 / 3EGFP, 7780...8574 / KanR/NeoR
Products
表皮生长因子(EGF),增殖刺激活性(MSA),POM121,跨膜,核蛋白,CMV 促进因子,新霉素,磷酸转移酶

06Handling and culture

Culture medium
DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, 加湿环境。

Supplements
在培养基中添加 10% FBS、0.5 mg/mL G418
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
丢弃旧培养基,用 PBS 冲洗细胞。加入新配制的 0.025%胰酶/0.02%乙二胺四乙酸溶液,加热至 37 摄氏度,等待细胞分离,通常需要 5 分钟左右。加入新鲜培养基中和胰蛋白酶,然后将细胞混合物转移到离心管中并离心。离心后,除去上清液,用新鲜培养基重悬细胞团,然后将悬浮液转移到新的烧瓶中。将 G418 加入培养基中,使其最终浓度达到 0.5 mg/ml
Seeding density
2至4×10⁴个细胞/平方厘米
Fluid renewal
每周 2 至 3 次
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。

Freeze medium
我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
Storage conditions

如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

Shipping conditions

冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

08Donor

Breed / subspecies
奥斯本-门德尔