NRK-Pom121-EGFP3
Cell line · Produktnummer 500669
Cellelinjen NRK-Pom121-EGFP3 stammer fra normale rottenyreceller (NRK) og er genetisk modifisert til å uttrykke fusjonsproteinet Pom121-EGFP3. Pom...
Tilpasning / Anbefalinger
- NRK-Pom121-EGFP3Cell line€800.00
01Generell informasjon
- Beskrivelse
NRK-Pom121-EGFP3-cellelinjen er avledet fra normale rottenyreceller (NRK) og er genetisk konstruert for å uttrykke fusjonsproteinet Pom121-EGFP3. Pom121 er et transmembran nukleoporin som er en integrert komponent i kjerneporkomplekset (NPC), og som spiller en avgjørende rolle i oppbyggingen av kjerneskjoldet og NPC-funksjonen. Inkluderingen av EGFP3-taggen (Enhanced Green Fluorescent Protein) gjør det enklere å visualisere og studere Pom121s dynamikk, lokalisering og interaksjoner i levende celler ved hjelp av fluorescensmikroskopi. Dette gjør NRK-Pom121-EGFP3-cellelinjen til et verdifullt verktøy for å undersøke nukleære transportmekanismer og NPC-arkitektur.
NRK-celler, som er foreldrelinjen til NRK-Pom121-EGFP3, brukes ofte i ulike forskningsapplikasjoner på grunn av sine stabile vekstegenskaper og epitelmorfologi. Modifiseringen til å uttrykke Pom121-EGFP3 gir forskere en robust modell for å undersøke de molekylære mekanismene som ligger til grunn for nukleocytoplasmatisk transport, den strukturelle organiseringen av NPC og dens regulering under celledeling og differensiering. I tillegg kan denne cellelinjen brukes til å studere effekten av ulike genetiske og farmakologiske forstyrrelser på NPC-funksjonen, noe som gir innsikt i sykdommer som er forbundet med nukleærtransportdefekter, for eksempel kreft og nevrodegenerative lidelser.
Alt i alt representerer NRK-Pom121-EGFP3-cellelinjen et sofistikert verktøy innen cellebiologi og molekylær forskning, som gir høyoppløselig innsikt i de dynamiske prosessene som styrer nukleocytoplasmatiske interaksjoner. Muligheten til å observere NPC-komponenter i sanntid i en levende cellulær kontekst gjør den uvurderlig for å øke vår forståelse av cellulære transportmekanismer og deres betydning for helse og sykdom.
- Vev
- Nyre
- Synonymer
- NRK Pom121-EGFP3
- NRK Pom121-3EGFP
- NRK-Pom121-3EGFP
02Klassifisering
- Organisme
- Rotte
- Vekstegenskaper
- Tilhenger
- Biosikkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Fibroblastlignende celler med fusiform form
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- NRK-Pom121-EGFP3 (Cytion katalognummer 500669)
- NCBI-skattenummer
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_AV96
- Innskjærer
- Ellenberg-laboratoriet (EMBL)
05Uttrykk og mottakelighet
- Reseptorer som uttrykkes
- Epidermal vekstfaktor (EGF), multiplikasjonsstimulerende aktivitet (MSA)
- Proteinekspresjon
- Pom121-EGFP3: Beliggenhet/Gen: 1..589 / Pcmv, 653..4250 / Pom121, 4251..4287 / null, 4318..6546 / 3EGFP, 7780..8574 / KanR/NeoR
- Produkter
- Epidermal vekstfaktor (EGF), multiplikasjonsstimulerende aktivitet (MSA), POM121, transmembran, nukleoporin, CMV-promotor, neomycin, fosfotransferase
06Håndtering og kultur
- Næringsmedium
- DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- Suppler mediet med 10 % FBS, 0,5 mg/mL G418
- Dissosiasjonsmiddel
- Accutase
- Subkultivering
- Kast det gamle mediet, og vask cellene med PBS. Tilsett en nytilberedt 0,025 % trypsin/0,02 % EDTA-løsning oppvarmet til 37 grader Celsius, og vent til cellene løsner, noe som vanligvis tar ca. 5 minutter. Nøytraliser trypsinet ved å tilsette nytt medium, og overfør deretter celleblandingen til et rør og sentrifuger. Etter sentrifugering fjerner du supernatanten, resuspenderer cellepelleten i nytt dyrkingsmedium og overfører suspensjonen til nye kolber. Tilsett G418 i dyrkningsmediet for å oppnå en sluttkonsentrasjon på 0,5 mg/ml
- Såtetthet
- 2 til 4 x 104 celler/cm2
- Væskefornyelse
- 2 til 3 ganger per uke
- Tining og dyrking
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
08Donor
- Rase / underart
- OsborneMendel
09Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Ansvarsfraskrivelse
- Cellene våre leveres utelukkende til in vitro-laboratorieforskningsformål og er ikke ment for klinisk eller diagnostisk bruk, og de skal heller ikke administreres til mennesker eller brukes til veterinærformål. Brukere må overholde alle gjeldende retningslinjer og forskrifter for håndtering og bruk av disse cellene i forskningssammenheng.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtaler med tredjeparter gjelder
- Ja
.jpg)