661W

661W הוא קו תאים שמקורו בקולטני צבע של עכברים, שנוצר במקור מגידול ברשתית של עכבר מהונדס גנטית המבטא את האנטיגן T הגדול של נגיף הקוף 40 (SV40) תחת בקרה של מקדם החלבון האנושי IRBP (interphotoreceptor retinoid-binding protein). הקו נוצר מתאי רשתית לאחר הלידה ומייצג תאי אב של קולטני אור קוניים שהפכו לבלתי מתכלים. תאי 661W מציגים צמיחה דבקה ונשמרים באופן שגרתי במדיום Eagle של Dulbecco, בתוספת סרום עגלי, בתנאי תרבית סטנדרטיים. הם משמשים באופן נרחב כמודל in vitro של קולטני אור קוניים, במיוחד במחקרים על נזק הנגרם מאור, לחץ חמצוני, אפופטוזיס ומנגנונים ניווניים ברשתית.

אפיון מולקולרי וטרנסקריפטומי מאשר שתאי 661W מבטאים את רוב סמני תאי הפוטורצפטורים הקוניים, כולל אופסינים קוניים וגנים הקשורים לפוטוטרנסדוקציה. מחקרי הדמיה ברזולוציה גבוהה מראים שתאים אלה יוצרים ריסים ראשוניים עם מאפיינים מבניים הדומים לריסים המחברים בין תאי הפוטורצפטורים לקטעים החיצוניים. ניתוחים אימונוציטוכימיים ואולטרא-מבניים מגלים לוקליזציה של חלבוני ריסים לאקסונמה, לממברנה ולאזור המעבר, מה שתומך בשימוש בהם בחקר צילופתיות ברשתית. מחקרים תפקודיים הראו כי דיכוי באמצעות siRNA של גנים המעורבים בהובלה תוך-פלגלתית, כגון Ift88, מוביל לאובדן ריסים, מה שמאשר את 661W כמערכת נוחה למחקרים מכניים של ביולוגיה של ריסים.

תאי 661W רגישים מאוד ללחץ פוטואוקסידטיבי. חשיפה לאור נראה גורמת למוות תאי אפופטוטי הקשור לדיכוי פעילות NF-κB והפעלת מסלולי קספאז. ביטוי יתר של חלבונים אנטי-אפופטוטיים כגון Bcl-2 מעניק עמידות לאפופטוזיס הנגרם על ידי אור, תוך שמירה על פעילות גרעינית של NF-κB ושיפור הישרדות התאים. תכונות אלה הופכות את 661W למודל חזק לניתוח מסלולים מולקולריים העומדים בבסיס ניוון הפוטורצפטורים. חשוב לציין כי קו 661W היה מעורב גם באירועים היסטוריים של זיהוי שגוי של קווי תאים, כולל זיהום צולב עם קו RGC-5, מה שמדגיש את הצורך באימות קפדני בעת השימוש במודל זה. בסך הכל, 661W מספק פלטפורמה מאופיינת היטב של פוטורצפטורים קוניים עכבריים לחקר ניוון הרשתית, תגובות ללחץ חמצוני, תפקוד ריסי וטיפולים המכוונים להישרדות הקונוסים.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו