661 W

661W je celična linija, pridobljena iz fotoreceptorjev mišjih čepkov, ki je bila prvotno vzpostavljena iz tumorja mrežnice, ki je nastal pri transgenih miših, ki izražajo velik T-antigen opičjega virusa 40 (SV40) pod nadzorom promotorja človeškega interfotoreceptorskega retinoidnega vezavnega proteina (IRBP). Linija je bila ustvarjena iz postnatalnih eksplantatov mrežnice in predstavlja nesmrne predhodnike fotoreceptorjev v čepkih. Celice 661W kažejo adhezivno rast in se rutinsko vzdržujejo v Dulbeccovem modificiranem Eagleovem mediju, dopolnjenem s fetalnim govejim serumom v standardnih pogojih gojenja. Široko se uporabljajo kot in vitro model fotoreceptorjev v čepkih, zlasti v študijah poškodb, povzročenih s svetlobo, oksidativnega stresa, apoptoze in degenerativnih mehanizmov mrežnice.

Molekularna in transkriptomska karakterizacija potrjuje, da celice 661W izražajo večino markerjev fotoreceptorjev stožčastega tipa, vključno z opsini stožčastega tipa in geni, povezanimi s fototransdukcijo. Visokoločljive slikovne študije kažejo, da te celice tvorijo primarne resničke s strukturnimi značilnostmi, ki spominjajo na resničke, ki povezujejo fotoreceptorje, in zunanje segmente. Imunocitokemične in ultrastrukturne analize razkrivajo lokalizacijo ciliarnega proteina v aksonemu, membrani in prehodni coni, kar podpira njihovo uporabnost pri preučevanju ciliopatij mrežnice. Funkcionalne študije so pokazale, da siRNA-posredovano izklop genov za intraflagelarni transport, kot je Ift88, vodi do izgube cilij, kar potrjuje 661W kot obvladljiv sistem za mehanistične študije ciliarne biologije.

Celice 661W so zelo občutljive na fotooksidativni stres. Izpostavljenost vidni svetlobi povzroča apoptično celično smrt, povezano z zmanjšanjem aktivnosti NF-κB in aktivacijo kaspaznih poti. Prekomerna ekspresija antiapoptičnih proteinov, kot je Bcl-2, daje odpornost proti svetlobno povzročeni apoptozi, ohranja jedrsko aktivnost NF-κB in izboljša preživetje celic. Te lastnosti delajo 661W robusten model za razčlenitev molekularnih poti, ki so osnova za degeneracijo fotoreceptorjev. Pomembno je omeniti, da je bila linija 661W vpletena tudi v zgodovinske primere napačne identifikacije celičnih linij, vključno s križno kontaminacijo z linijo RGC-5, kar poudarja nujnost stroge avtentifikacije pri uporabi tega modela. Skupaj 661W zagotavlja dobro karakterizirano platformo mišjih fotoreceptorjev za preučevanje degeneracije mrežnice, odzivov na oksidativni stres, ciliarne funkcije in terapevtskih posegov, usmerjenih v preživetje fotoreceptorjev.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo