661 W

661W er en murin fotoreseptor-avledet cellelinje som opprinnelig ble etablert fra en netthinne-svulst som oppstod i en transgen mus som uttrykker simian virus 40 (SV40) stort T-antigen under kontroll av det humane interfotoreceptor-retinoidbindende proteinet (IRBP) promotoren. Linjen ble generert fra postnatale netthinneeksplantater og representerer udødeliggjorte fotoreseptorforløpere. 661W-celler viser vedheftende vekst og oppbevares rutinemessig i Dulbeccos modifiserte Eagle-medium tilsatt føtal bovint serum under standard dyrkningsforhold. De har blitt mye brukt som en in vitro-modell av fotoreseptorer, særlig i studier av lysindusert skade, oksidativt stress, apoptose og degenerative mekanismer i netthinnen.

Molekylær og transkriptomisk karakterisering bekrefter at 661W-celler uttrykker de fleste markører for fotoreceptorer i tappe, inkludert tappeopsiner og fototransduksjonsassosierte gener. Høyoppløselige bildediagnostiske studier viser at disse cellene danner primære cilier med strukturelle trekk som minner om fotoreceptorers forbindelsescilier og ytre segmenter. Immunocytokjemiske og ultrastrukturelle analyser avslører lokalisering av ciliære proteiner til aksonemet, membranen og overgangssonen, noe som støtter deres nytte i undersøkelser av ciliopatier i netthinnen. Funksjonelle studier har vist at siRNA-mediert nedregulering av intraflagellære transportgener som Ift88 fører til tap av cilia, noe som validerer 661W som et håndterbart system for mekanistiske studier av ciliærbiologi.

661W-celler er svært følsomme for fotooksidativt stress. Eksponering for synlig lys induserer apoptotisk celledød assosiert med nedregulering av NF-κB-aktivitet og aktivering av caspase-veier. Overekspresjon av anti-apoptotiske proteiner som Bcl-2 gir resistens mot lysindusert apoptose, opprettholder NF-κB-kjerneaktivitet og forbedrer celleoverlevelse. Disse egenskapene gjør 661W til en robust modell for å dissekere molekylære veier som ligger til grunn for fotoreseptordegenerasjon. Det er viktig å merke seg at 661W-linjen også har vært involvert i historiske tilfeller av feilidentifisering av cellelinjer, inkludert krysskontaminering med RGC-5-linjen, noe som understreker nødvendigheten av streng autentisering når denne modellen brukes. Samlet sett gir 661W en godt karakterisert murin fotoreseptorplattform for studier av retinal degenerasjon, oksidativ stressrespons, ciliær funksjon og terapeutiske intervensjoner rettet mot overlevelse av fotoreseptorer.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring