661 W

661W, insan interfotoreceptor retinoid bağlayıcı protein (IRBP) promotörünün kontrolü altında simian virüs 40 (SV40) büyük T antijenini eksprese eden transgenik bir farede ortaya çıkan retina tümöründen elde edilen, fare koni fotoreseptöründen türetilmiş bir hücre hattıdır. Bu hat, doğum sonrası retina eksplantlarından üretilmiştir ve ölümsüzleştirilmiş koni fotoreseptör öncüllerini temsil eder. 661W hücreleri yapışkan büyüme gösterir ve standart kültür koşullarında fetal sığır serumu ile takviye edilmiş Dulbecco'nun modifiye Eagle besiyerinde rutin olarak muhafaza edilir. Bu hücreler, özellikle ışık kaynaklı hasar, oksidatif stres, apoptoz ve retina dejeneratif mekanizmaları ile ilgili çalışmalarda koni fotoreseptörlerinin in vitro modeli olarak yaygın olarak kullanılmaktadır.

Moleküler ve transkriptomik karakterizasyon, 661W hücrelerinin koni opsini ve fototransdüksiyonla ilişkili genler dahil olmak üzere koni fotoreseptör belirteçlerinin çoğunu eksprese ettiğini doğrulamaktadır. Yüksek çözünürlüklü görüntüleme çalışmaları, bu hücrelerin fotoreseptör bağlantı kirpikleri ve dış segmentleri anımsatan yapısal özelliklere sahip birincil kirpikler oluşturduğunu göstermektedir. İmmünositokimyasal ve ultrastrüktürel analizler, siliyer proteinlerin aksonem, membran ve geçiş bölgesinde lokalize olduğunu ortaya koyarak, bunların retina siliyopatilerini araştırmada yararlı olduğunu desteklemektedir. Fonksiyonel çalışmalar, Ift88 gibi intraflagellar transport genlerinin siRNA aracılı knockdown'ının siliyaların kaybına yol açtığını göstererek, 661W'nin siliyer biyolojisinin mekanistik çalışmaları için işlenebilir bir sistem olduğunu doğrulamıştır.

661W hücreleri, fotooksidatif strese karşı oldukça duyarlıdır. Görünür ışığa maruz kalma, NF-κB aktivitesinin aşağı regülasyonu ve kaspaz yolaklarının aktivasyonu ile ilişkili apoptotik hücre ölümünü indükler. Bcl-2 gibi anti-apoptotik proteinlerin aşırı ekspresyonu, ışıkla indüklenen apoptoza direnç kazandırır, NF-κB nükleer aktivitesini korur ve hücre sağkalımını iyileştirir. Bu özellikler, 661W'yi fotoreseptör dejenerasyonunun altında yatan moleküler yolakları incelemek için sağlam bir model haline getirir. 661W hattının, RGC-5 hattıyla çapraz kontaminasyon dahil olmak üzere, tarihsel hücre hattı yanlış tanımlama olaylarında da rol oynadığına dikkat etmek önemlidir; bu da, bu modeli kullanırken titiz bir doğrulama yapılmasının gerekliliğini vurgulamaktadır. Toplamda, 661W, retina dejenerasyonu, oksidatif stres tepkileri, siliyer fonksiyon ve koni hayatta kalmasını hedefleyen terapötik müdahaleleri incelemek için iyi karakterize edilmiş bir murin koni fotoreseptör platformu sağlar.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın