661 W

661W yra pelės kūgio fotoreceptorių kilmės ląstelių linija, iš pradžių sukurta iš tinklainės naviko, atsiradusio transgeninėje pelėje, kuri ekspresuoja simian virus 40 (SV40) didelį T antigeną, kontroliuojamą žmogaus interfotoreceptorių retinoidų rišimosi baltymo (IRBP) promotoriaus. Linija buvo sukurta iš postnatalinių tinklainės eksplantatų ir atstovauja nemirtingus kūginių fotoreceptorių pirmtakus. 661W ląstelės pasižymi adheziniu augimu ir yra reguliariai išlaikomos Dulbecco modifikuotoje Eagle terpėje, papildytoje veršelių serumu, standartinėmis kultivavimo sąlygomis. Jos plačiai naudojamos kaip kūginių fotoreceptorių in vitro modelis, ypač tyrimuose, susijusiuose su šviesos sukeltu pažeidimu, oksidaciniu stresu, apoptoze ir tinklainės degeneraciniais mechanizmais.

Molekulinė ir transkriptominė charakteristika patvirtina, kad 661W ląstelės išreiškia daugumą kūginio fotoreceptoriaus žymenų, įskaitant kūginio opsino ir fototransdukcijos susijusius genus. Aukštos raiškos vaizdavimo tyrimai rodo, kad šios ląstelės formuoja pirminius cilius, kurių struktūrinės savybės primena fotoreceptoriaus jungiančius cilius ir išorinius segmentus. Imunocitocheminiai ir ultrastruktūriniai tyrimai atskleidžia cilių baltymų lokalizaciją aksoneme, membranoje ir pereinamojoje zonoje, patvirtindami jų naudą tiriant tinklainės ciliopatijas. Funkciniai tyrimai parodė, kad siRNA mediavimas intraflagelinio transporto genų, tokių kaip Ift88, slopinimas veda prie cilių praradimo, patvirtindamas 661W kaip lengvai valdomą sistemą cilių biologijos mechanizmo tyrimams.

661W ląstelės yra labai jautrios fotooksidaciniam stresui. Poveikis matomai šviesai sukelia apoptozinę ląstelių mirtį, susijusią su NF-κB aktyvumo sumažėjimu ir kaspazės kelių aktyvacija. Antiapoptozinių baltymų, pvz., Bcl-2, perteklius suteikia atsparumą šviesos sukeltam apoptozei, išlaikydamas NF-κB branduolinį aktyvumą ir pagerindamas ląstelių išgyvenimą. Šios savybės daro 661W patikimu modeliu fotoreceptorių degeneracijos molekulinės grandinės analizėms. Svarbu pažymėti, kad 661W linija taip pat buvo susijusi su istorinėmis ląstelių linijos klaidingo identifikavimo atvejais, įskaitant kryžminį užteršimą RGC-5 linija, o tai pabrėžia griežto autentiškumo patvirtinimo būtinybę naudojant šį modelį. Apibendrinant, 661W suteikia gerai apibūdintą pelių kūginių fotoreceptorių platformą tinklainės degeneracijos, oksidacinio streso reakcijų, ciliarinės funkcijos ir terapinių intervencijų, skirtų kūginių išgyvenimui, tyrimams.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime