661 W

661W je bunková línia odvodená z fotoreceptorov myších čapíkov, pôvodne vytvorená z nádoru sietnice, ktorý vznikol u transgennej myši exprimujúcej veľký T antigén opičieho vírusu 40 (SV40) pod kontrolou promotora ľudského interfotoreceptorového retinoid-viažuceho proteínu (IRBP). Línia bola vytvorená z postnatálnych explantátov sietnice a predstavuje imortalizované prekurzory fotoreceptorov čapíkov. Bunky 661W vykazujú adhezívny rast a sú bežne udržiavané v Dulbeccovom modifikovanom Eagleovom médiu doplnenom fetálnym bovinným sérom za štandardných kultivačných podmienok. Sú široko používané ako in vitro model fotoreceptorov čapíkov, najmä v štúdiách poškodenia vyvolaného svetlom, oxidačného stresu, apoptózy a degeneratívnych mechanizmov sietnice.

Molekulárna a transkriptomická charakterizácia potvrdzuje, že bunky 661W exprimujú väčšinu markerov fotoreceptorov čapíkov, vrátane opsínov čapíkov a génov spojených s fototransdukciou. Vysokorozlíšiteľné zobrazovacie štúdie preukazujú, že tieto bunky tvoria primárne riasinky so štrukturálnymi vlastnosťami pripomínajúcimi riasinky spájajúce fotoreceptory a vonkajšie segmenty. Imunocytochemické a ultrastrukturálne analýzy odhaľujú lokalizáciu riasinkových proteínov v axonéme, membráne a prechodovej zóne, čo potvrdzuje ich užitočnosť pri skúmaní ciliopatií sietnice. Funkčné štúdie ukázali, že siRNA-mediovaný knockdown génov intraflagelárneho transportu, ako je Ift88, vedie k strate riasiniek, čo potvrdzuje 661W ako poddajný systém pre mechanistické štúdie biológie riasiniek.

Bunky 661W sú vysoko citlivé na fotooxidatívny stres. Vystavenie viditeľnému svetlu indukuje apoptotickú bunkovú smrť spojenú s downreguláciou aktivity NF-κB a aktiváciou kaspázových dráh. Nadmerná expresia antiapoptotických proteínov, ako je Bcl-2, poskytuje odolnosť voči apoptóze indukovanej svetlom, udržiava jadrovú aktivitu NF-κB a zlepšuje prežívanie buniek. Tieto vlastnosti robia z 661W robustný model na rozbor molekulárnych dráh, ktoré sú základom degenerácie fotoreceptorov. Je dôležité poznamenať, že línia 661W bola tiež zapojená do historických prípadov nesprávnej identifikácie bunkových línií, vrátane krížovej kontaminácie s líniou RGC-5, čo podčiarkuje nutnosť prísnej autentifikácie pri používaní tohto modelu. Celkovo poskytuje 661W dobre charakterizovanú platformu myších fotoreceptorov čapíkov na štúdium degenerácie sietnice, reakcií na oxidačný stres, funkcie ciliárnych buniek a terapeutických intervencií zameraných na prežitie čapíkov.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke