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661W
ティッシュ
眼、網膜
転移部位
原発腫瘍の発生部位(網膜)
同義語
661w, 661 W

661W

Cell line · 製品番号 305889

661Wは、サルウイルス40を発現するトランスジェニックマウスに発生した網膜腫瘍から最初に樹立された、マウスの錐体光受容体由来の細胞株である...

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01概要

説明

661Wは、ヒト光受容体間レチノイド結合タンパク質(IRBP)プロモーター制御下でサルウイルス40(SV40)大型T抗原を発現するトランスジェニックマウスに発生した網膜腫瘍から樹立された、マウス錐体光受容体由来の細胞株である。 この細胞株は出生後網膜組織片から作製され、不死化した錐体光受容体前駆細胞を表現している。661W細胞は接着性増殖を示し、標準培養条件下で胎児牛血清添加デュルベッコ修正版イーグル培地(DMEM)を用いて維持される。光誘発損傷、酸化ストレス、アポトーシス、網膜変性メカニズムの研究において、錐体光受容体のin vitroモデルとして広く利用されている。

分子およびトランスクリプトーム解析により、661W細胞が錐体視細胞マーカーの大部分(錐体オプシンおよび光変換関連遺伝子を含む)を発現することが確認されている。高解像度イメージング研究では、これらの細胞が一次繊毛を形成し、その構造的特徴が視細胞の接続繊毛および外節を想起させることを示している。 免疫組織化学的および超微細構造解析により、繊毛タンパク質が軸糸、膜、移行帯に局在することが明らかになり、網膜繊毛病の研究における有用性が裏付けられた。機能研究では、Ift88などの繊毛内輸送遺伝子のsiRNAによるノックダウンが繊毛の喪失を引き起こすことが示され、661W細胞が繊毛生物学の機序研究に適した扱いやすいシステムであることを実証した。

661W細胞は光酸化ストレスに対して非常に敏感である。 可視光線への曝露は、NF-κB活性の低下およびカスパーゼ経路の活性化を伴うアポトーシス細胞死を誘導する。Bcl-2などの抗アポトーシスタンパク質の過剰発現は、光誘発アポトーシスに対する耐性を付与し、NF-κBの核内活性を維持して細胞生存率を向上させる。これらの特性により、661Wは光受容体変性の基盤となる分子経路を解明する強力なモデルとなっている。 重要な注意点として、661W株はRGC-5株との交差汚染を含む歴史的な細胞株誤同定事件に関与したことが報告されており、本モデル系を使用する際には厳密な認証が不可欠である。総合的に、661Wは網膜変性、酸化ストレス応答、毛様体機能、および錐体生存を標的とした治療介入の研究に、よく特徴づけられたマウス錐体光受容体プラットフォームを提供する。

ティッシュ
眼、網膜
転移部位
原発腫瘍の発生部位(網膜)
用途
錐体光受容体の生物学;光誘発性網膜変性;酸化ストレスによるアポトーシス;光受容体の繊毛の生物学;網膜変性疾患のモデル化;NF-κBおよびカスパーゼ経路の研究;眼科用医薬品の評価
同義語
  • 661w
  • 661 W

02分類

生物
マウス
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: The 661W line was derived from a transgenic mouse expressing SV40 large T antigen under the IRBP promoter; this transgene drives photoreceptor-specific immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
錐体光受容体様
細胞の種類
網膜の錐体細胞
倍増時間
~24時間

04識別子

引用
661W(サイシオン カタログ番号 305889)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_6240

05取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
分割比率
1~5
播種密度
1~3 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
2~3日ごと
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06品質管理と凍結保存

凍結培地
凍結保存培地としては、解凍後の生存率を十分に高めるため、完全増殖培地+10%DMSOを使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

ドナーの年齢
年齢不詳