661W

La línea celular 661W es una línea derivada de fotorreceptores de conos murinos, establecida originalmente a partir de un tumor retiniano que surgió en un ratón transgénico que expresaba el antígeno T grande del virus simio 40 (SV40) bajo el control del promotor de la proteína de unión a retinoides interfotorreceptora (IRBP) humana. La línea se generó a partir de explantes retinianos posnatales y representa precursores inmortalizados de fotorreceptores de cono. Las células 661W presentan un crecimiento adherente y se mantienen habitualmente en medio Eagle modificado de Dulbecco suplementado con suero fetal bovino bajo condiciones estándar de cultivo. Se han utilizado ampliamente como modelo in vitro de fotorreceptores de conos, particularmente en estudios sobre daño inducido por la luz, estrés oxidativo, apoptosis y mecanismos de degeneración retiniana.

La caracterización molecular y transcriptómica confirma que las células 661W expresan la mayoría de los marcadores de los fotorreceptores de conos, incluidas las opsinas de los conos y los genes asociados a la fototransducción. Los estudios de imágenes de alta resolución demuestran que estas células forman cilios primarios con características estructurales que recuerdan a los cilios de conexión de los fotorreceptores y a los segmentos externos. Los análisis inmunocitoquímicos y ultraestructurales revelan la localización de proteínas ciliares en el axonema, la membrana y la zona de transición, lo que respalda su utilidad en la investigación de las ciliopatías retinianas. Los estudios funcionales han demostrado que la inhibición mediada por ARNip de genes del transporte intraflagelar, como el Ift88, conduce a la pérdida de cilios, lo que valida a la 661W como un sistema manejable para estudios mecanísticos de la biología ciliar.

Las células 661W son altamente sensibles al estrés fotooxidativo. La exposición a la luz visible induce la muerte celular por apoptosis, asociada con la regulación a la baja de la actividad de NF-κB y la activación de las vías de las caspasas. La sobreexpresión de proteínas antiapoptóticas, como Bcl-2, confiere resistencia a la apoptosis inducida por la luz, lo que mantiene la actividad nuclear de NF-κB y mejora la supervivencia celular. Estas propiedades convierten a la 661W en un modelo robusto para analizar las vías moleculares subyacentes a la degeneración de los fotorreceptores. Es importante señalar que la línea 661W también se ha visto implicada en casos históricos de identificación errónea de líneas celulares, incluida la contaminación cruzada con la línea RGC-5, lo que subraya la necesidad de una autenticación rigurosa al emplear este modelo. En conjunto, la 661W ofrece una plataforma de fotorreceptores de conos murinos bien caracterizada para estudiar la degeneración retiniana, las respuestas al estrés oxidativo, la función ciliar y las intervenciones terapéuticas dirigidas a la supervivencia de los conos.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.