661 W

661W é uma linha celular derivada de fotorreceptores de cones murinos, originalmente estabelecida a partir de um tumor retiniano que surgiu num rato transgénico que expressava o antígeno T grande do vírus símio 40 (SV40) sob o controlo do promotor da proteína de ligação retinóide interfotorreceptora humana (IRBP). A linha foi gerada a partir de explantes retinianos pós-natais e representa precursores imortalizados de fotorreceptores de cones. As células 661W exibem crescimento aderente e são mantidas rotineiramente em meio Eagle modificado de Dulbecco suplementado com soro fetal bovino em condições de cultura padrão. Elas têm sido amplamente utilizadas como um modelo in vitro de fotorreceptores de cones, particularmente em estudos de danos induzidos pela luz, stress oxidativo, apoptose e mecanismos degenerativos da retina.

A caracterização molecular e transcriptómica confirma que as células 661W expressam a maioria dos marcadores de fotorreceptores de cones, incluindo opsinas de cones e genes associados à fototransdução. Estudos de imagem de alta resolução demonstram que estas células formam cílios primários com características estruturais que lembram os cílios de conexão dos fotorreceptores e os segmentos externos. Análises imunocitoquímicas e ultraestruturais revelam a localização de proteínas ciliares no axonema, membrana e zona de transição, apoiando a sua utilidade na investigação de ciliopatias retinianas. Estudos funcionais demonstraram que o knockdown mediado por siRNA de genes de transporte intraflagelar, como o Ift88, leva à perda de cílios, validando o 661W como um sistema maleável para estudos mecanísticos da biologia ciliar.

As células 661W são altamente sensíveis ao stress fotooxidativo. A exposição à luz visível induz a morte celular apoptótica associada à regulação negativa da atividade do NF-κB e à ativação das vias da caspase. A superexpressão de proteínas antiapoptóticas, como Bcl-2, confere resistência à apoptose induzida pela luz, mantendo a atividade nuclear do NF-κB e melhorando a sobrevivência celular. Essas propriedades tornam o 661W um modelo robusto para dissecar as vias moleculares subjacentes à degeneração dos fotorreceptores. É importante notar que a linha 661W também esteve envolvida em eventos históricos de identificação incorreta de linhas celulares, incluindo contaminação cruzada com a linha RGC-5, ressaltando a necessidade de autenticação rigorosa ao empregar este modelo. Coletivamente, a 661W fornece uma plataforma fotorreceptora de cones murinos bem caracterizada para o estudo da degeneração retiniana, respostas ao stress oxidativo, função ciliar e intervenções terapêuticas direcionadas à sobrevivência dos cones.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia