Skip to content
661W
Tissue
Mắt, võng mạc
Metastatic site
Vị trí khối u nguyên phát (võng mạc)
Synonyms
661w, 661 W

Documents

661W

Cell line · Product number 305889

661W is a murine cone photoreceptor-derived cell line originally established from a retinal tumor arising in a transgenic mouse expressing simian virus 40...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

661W là dòng tế bào được phân lập từ tế bào thụ thể ánh sáng hình nón của chuột, ban đầu được thiết lập từ một khối u võng mạc phát triển ở chuột biến đổi gen biểu hiện kháng nguyên T lớn của virus khỉ 40 (SV40) dưới sự điều khiển của promoter protein liên kết retinoid giữa các tế bào thụ thể ánh sáng (IRBP) của người. Dòng tế bào này được tạo ra từ các mẫu mô võng mạc sau sinh và đại diện cho các tiền thân tế bào thụ thể hình nón bất tử. Tế bào 661W có khả năng phát triển bám dính và được duy trì thường xuyên trong môi trường nuôi cấy Dulbecco’s modified Eagle medium bổ sung huyết thanh bò non dưới điều kiện nuôi cấy tiêu chuẩn. Chúng đã được sử dụng rộng rãi như một mô hình in vitro của tế bào thụ thể hình nón, đặc biệt trong các nghiên cứu về tổn thương do ánh sáng, stress oxy hóa, apoptosis và các cơ chế thoái hóa võng mạc.

Phân tích phân tử và chuyển mã xác nhận rằng các tế bào 661W biểu hiện hầu hết các dấu hiệu của tế bào thụ quang hình nón, bao gồm opsins hình nón và các gen liên quan đến quá trình chuyển đổi ánh sáng. Các nghiên cứu hình ảnh độ phân giải cao cho thấy các tế bào này hình thành lông nguyên phát với các đặc điểm cấu trúc tương tự như lông kết nối của tế bào thụ quang và đoạn ngoài. Các phân tích miễn dịch hóa học và siêu cấu trúc cho thấy sự phân bố của các protein lông mao tại trục lông mao, màng và vùng chuyển tiếp, hỗ trợ tính hữu ích của chúng trong việc nghiên cứu các rối loạn lông mao võng mạc. Các nghiên cứu chức năng đã chỉ ra rằng việc ức chế gen vận chuyển nội lông mao như Ift88 bằng siRNA dẫn đến mất lông mao, xác nhận 661W là một hệ thống dễ dàng để nghiên cứu cơ chế sinh học của lông mao.

Tế bào 661W rất nhạy cảm với stress oxy hóa do ánh sáng. Tiếp xúc với ánh sáng khả kiến gây ra cái chết tế bào theo chương trình liên quan đến sự ức chế hoạt động của NF-κB và kích hoạt các con đường caspase. Sự biểu hiện quá mức của các protein chống apoptosis như Bcl-2 mang lại khả năng kháng lại apoptosis do ánh sáng gây ra, duy trì hoạt động của NF-κB trong nhân và cải thiện sự sống còn của tế bào. Những đặc tính này khiến 661W trở thành một mô hình mạnh mẽ để phân tích các con đường phân tử cơ bản của sự thoái hóa tế bào cảm quang. Cần lưu ý rằng dòng tế bào 661W cũng đã được liên kết với các sự cố xác định sai dòng tế bào trong quá khứ, bao gồm cả sự nhiễm chéo với dòng RGC-5, nhấn mạnh sự cần thiết của việc xác thực nghiêm ngặt khi sử dụng mô hình này. Tổng thể, 661W cung cấp một nền tảng tế bào thụ thể nón chuột được đặc trưng kỹ lưỡng để nghiên cứu thoái hóa võng mạc, phản ứng với stress oxy hóa, chức năng thể mi và các can thiệp điều trị nhắm vào sự sống còn của tế bào nón.

Tissue
Mắt, võng mạc
Metastatic site
Vị trí khối u nguyên phát (võng mạc)
Applications
Sinh học tế bào cảm quang hình nón; thoái hóa võng mạc do ánh sáng gây ra; quá trình apoptosis do stress oxy hóa; sinh học lông mao của tế bào cảm quang; mô hình hóa bệnh thoái hóa võng mạc; nghiên cứu về con đường tín hiệu NF-κB và caspase; đánh giá thuốc nhãn khoa
Synonyms
  • 661w
  • 661 W

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: The 661W line was derived from a transgenic mouse expressing SV40 large T antigen under the IRBP promoter; this transgene drives photoreceptor-specific immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự tế bào cảm quang hình nón
Cell type
Tế bào hình nón ở võng mạc
Doubling time
khoảng 24 giờ

04Identifiers

Citation
661W (Số catalog Cytion 305889)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_6240

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Split ratio
1 đến 5
Seeding density
1 đến 3 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
Mỗi 2 đến 3 ngày
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Với tư cách là môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sót sau khi rã đông.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Donor age
Tuổi không xác định