661 W

661W er en musecelle-fotoreceptor-afledt cellelinje, der oprindeligt blev etableret fra en nethindetumor, der opstod i en transgen mus, der udtrykker simian virus 40 (SV40) stort T-antigen under kontrol af det humane interfotoreceptor-retinoidbindende protein (IRBP)-promotor. Linjen blev genereret fra postnatale nethindeeksplantater og repræsenterer udødeliggjorte keglefotoreceptorforstadier. 661W-celler udviser adhærent vækst og opbevares rutinemæssigt i Dulbeccos modificerede Eagle-medium tilsat føtal bovint serum under standardkulturforhold. De er blevet brugt i vid udstrækning som en in vitro-model for keglefotoreceptorer, især i studier af lysinduceret skade, oxidativt stress, apoptose og degenerative mekanismer i nethinden.

Molekylær og transkriptomisk karakterisering bekræfter, at 661W-celler udtrykker størstedelen af keglefotoreceptormarkører, herunder kegleopsiner og fototransduktionsassocierede gener. Højopløselige billeddannelsesundersøgelser viser, at disse celler danner primære cilier med strukturelle træk, der minder om fotoreceptorforbindende cilier og ydre segmenter. Immunocytokemiske og ultrastrukturelle analyser afslører lokalisering af cilieproteiner til axonemet, membranen og overgangszonen, hvilket understøtter deres anvendelighed i undersøgelsen af retinale ciliopatier. Funktionelle undersøgelser har vist, at siRNA-medieret nedregulering af intraflagellære transportgener såsom Ift88 fører til tab af cilier, hvilket validerer 661W som et håndterbart system til mekanistiske undersøgelser af ciliebiologi.

661W-celler er meget følsomme over for fotooxidativt stress. Udsættelse for synligt lys inducerer apoptotisk celledød forbundet med nedregulering af NF-κB-aktivitet og aktivering af caspase-veje. Overekspression af anti-apoptotiske proteiner såsom Bcl-2 giver resistens over for lysinduceret apoptose, opretholder NF-κB-nuklear aktivitet og forbedrer cellernes overlevelse. Disse egenskaber gør 661W til en robust model til at dissekere molekylære veje, der ligger til grund for fotoreceptordegeneration. Det er vigtigt at bemærke, at 661W-linjen også har været impliceret i historiske tilfælde af fejlagtig identifikation af cellelinjer, herunder krydskontaminering med RGC-5-linjen, hvilket understreger nødvendigheden af streng autentificering, når denne model anvendes. Samlet set udgør 661W en velkarakteriseret platform for murine keglefotoreceptorer til undersøgelse af retinal degeneration, oxidative stressresponser, ciliær funktion og terapeutiske interventioner rettet mod kegleoverlevelse.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring