661W

661W adalah garis sel yang berasal dari fotoreseptor kerucut tikus, yang awalnya didirikan dari tumor retina yang muncul pada tikus transgenik yang mengekspresikan antigen T besar virus simian 40 (SV40) di bawah kendali promotor protein pengikat retinoid antar-fotoreseptor manusia (IRBP). Baris sel ini dihasilkan dari eksplan retina pasca-lahir dan mewakili sel pendahulu fotoreseptor kerucut yang diimortalkan. Sel 661W menunjukkan pertumbuhan adheren dan secara rutin dipertahankan dalam medium Dulbecco’s modified Eagle yang diperkaya dengan serum sapi janin (FBS) dalam kondisi kultur standar. Sel ini telah banyak digunakan sebagai model in vitro fotoreseptor kerucut, terutama dalam studi kerusakan yang diinduksi cahaya, stres oksidatif, apoptosis, dan mekanisme degenerasi retina.

Karaktersisasi molekuler dan transkriptomik menunjukkan bahwa sel 661W mengekspresikan sebagian besar penanda fotoreseptor kerucut, termasuk opsins kerucut dan gen yang terkait dengan fototransduksi. Studi pencitraan beresolusi tinggi menunjukkan bahwa sel-sel ini membentuk silia primer dengan fitur struktural yang mirip dengan silia penghubung fotoreseptor dan segmen luar. Analisis imunositokimia dan ultrastruktural mengungkapkan lokalisasi protein silia ke aksonema, membran, dan zona transisi, mendukung kegunaannya dalam menyelidiki ciliopati retina. Studi fungsional menunjukkan bahwa penghambatan gen transportasi intraflagellar seperti Ift88 melalui siRNA menyebabkan hilangnya silia, mengonfirmasi 661W sebagai sistem yang dapat diandalkan untuk studi mekanistik biologi silia.

Sel 661W sangat sensitif terhadap stres fotooksidatif. Paparan cahaya tampak memicu kematian sel apoptosis yang terkait dengan penurunan aktivitas NF-κB dan aktivasi jalur caspase. Overekspresi protein anti-apoptosis seperti Bcl-2 memberikan resistensi terhadap apoptosis yang diinduksi cahaya, mempertahankan aktivitas nuklir NF-κB, dan meningkatkan kelangsungan hidup sel. Sifat-sifat ini menjadikan 661W model yang andal untuk menganalisis jalur molekuler yang mendasari degenerasi fotoreseptor. Perlu dicatat bahwa garis sel 661W juga terlibat dalam peristiwa identifikasi sel yang salah di masa lalu, termasuk kontaminasi silang dengan garis sel RGC-5, menyoroti pentingnya autentikasi yang ketat saat menggunakan model ini. Secara keseluruhan, 661W menyediakan platform fotoreseptor kerucut tikus yang terdefinisi dengan baik untuk mempelajari degenerasi retina, respons stres oksidatif, fungsi silia, dan intervensi terapeutik yang menargetkan kelangsungan hidup kerucut.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami