661 W

661W je buněčná linie odvozená z fotoreceptorů kužele myší, původně vytvořená z nádoru sítnice vzniklého u transgenní myši exprimující velký T antigen opičího viru 40 (SV40) pod kontrolou promotoru lidského interfotoreceptorového retinoid-vázajícího proteinu (IRBP). Linie byla vytvořena z postnatálních explantátů sítnice a představuje imortalizované prekurzory fotoreceptorů čípků. Buňky 661W vykazují adhezivní růst a jsou běžně udržovány v Dulbeccově modifikovaném Eagleově médiu doplněném fetálním bovinním sérem za standardních kultivačních podmínek. Jsou široce používány jako in vitro model fotoreceptorů čípků, zejména ve studiích poškození vyvolaného světlem, oxidačního stresu, apoptózy a degenerativních mechanismů sítnice.

Molekulární a transkriptomická charakterizace potvrzuje, že buňky 661W exprimují většinu markerů fotoreceptorů čípků, včetně opsinu čípků a genů spojených s fototransdukcí. Studie s vysokým rozlišením ukazují, že tyto buňky tvoří primární řasinky se strukturálními rysy připomínajícími řasinky spojující fotoreceptory a vnější segmenty. Imunocytochemické a ultrastrukturální analýzy odhalují lokalizaci ciliárních proteinů v axonému, membráně a přechodové zóně, což podporuje jejich užitečnost při výzkumu ciliopatií sítnice. Funkční studie ukázaly, že siRNA-zprostředkovaný knockdown genů intraflagelárního transportu, jako je Ift88, vede ke ztrátě řasinek, což potvrzuje, že 661W je vhodný systém pro mechanistické studie biologie řasinek.

Buňky 661W jsou vysoce citlivé na fotooxidativní stres. Vystavení viditelnému světlu indukuje apoptotickou buněčnou smrt spojenou s downregulací aktivity NF-κB a aktivací kaspázových drah. Nadměrná exprese antiapoptotických proteinů, jako je Bcl-2, conferuje odolnost vůči světlem indukované apoptóze, udržuje jadernou aktivitu NF-κB a zlepšuje přežití buněk. Tyto vlastnosti činí 661W robustním modelem pro rozbor molekulárních drah, které jsou základem degenerace fotoreceptorů. Je důležité poznamenat, že linie 661W byla také zapojena do historických případů nesprávné identifikace buněčných linií, včetně křížové kontaminace s linií RGC-5, což podtrhuje nutnost přísné autentizace při použití tohoto modelu. Celkově poskytuje 661W dobře charakterizovanou platformu myších fotoreceptorů čípků pro studium degenerace sítnice, reakcí na oxidační stres, funkce řasinek a terapeutických intervencí zaměřených na přežití čípků.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení